2023 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of the mechanism of DNA vaccine efficacy in fish
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20H03081
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| Research Institution | Fisheries Research and Education Agency |
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Principal Investigator |
高野 倫一 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(南勢), 主任研究員 (40533998)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杣本 智軌 九州大学, 農学研究院, 准教授 (40403993)
松浦 雄太 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(南勢), 研究員 (40823894)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | DNAワクチン / ギンブナ / ラブドウイルス / 受動免疫 / 中和抗体 / 白血球 / CD8 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
海外のアトランティックサーモン養殖ではDNAワクチンが使用されており、今後も魚類用DNAワクチンが開発され普及していくと思われる。一方、魚類には細胞性免疫機能の解析ツールがほとんど存在しないため、DNAワクチンの有効性発揮メカニズムに関して断片的な情報しか無い。このメカニズムを解明することはDNAワクチン開発効率化の一助になると考えられる。本研究では、白血球移入実験が可能なクローンギンブナを利用して、DNAワクチン接種魚で生じる免疫応答を解析した。病原体にはギンブナに致死的な感染を起こすCarp Haematopoietic Necrosis Virus（CHNV）をモデルとして利用した。
具体的な研究成果としては、1)CHNVのグリコプロテイン遺伝子から作製したDNAワクチン(pcDNA6-CHNVg)を筋肉注射したギンブナで、CHNVに対する感染防御効果を認めた。2)pcDNA6-CHNVg接種ギンブナのCD8+T細胞またはそれ以外の白血球（CD8－白血球）を移植したnaiveギンブナを準備し、CHNVで攻撃したところ、CD8－白血球移植にのみ死亡率を低下させる効果を認めた。3)pcDNA6-CHNVg接種ギンブナのCD8－白血球とCHNV感染したギンブナ培養細胞を共培養した場合には1600種類以上の遺伝子が発現変動したが、CD8+T細胞とCHNV感染培養細胞との共培養ではほとんど発現変動しないことを明らかにした。4)pcDNA6-CHNVg接種ギンブナの非動化血清にはCHNV中和活性が認められた。
以上から、CHNVに対するDNAワクチンの有効性発揮には、CD8－白血球や中和抗体が重要な役割を果たすことが示された。
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| Research Progress Status |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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