2022 Fiscal Year Annual Research Report
易傷害性肝グラフトの至適体外灌流法と非侵襲的グラフト機能評価法の開発
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20H03737
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
嶋村 剛 北海道大学, 大学病院, 准教授 (00333617)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉森 博行 北海道大学, 保健科学研究院, 准教授 (20711899)
深井 原 北海道大学, 医学研究院, 特任講師 (60374344)
暮地本 宙己 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (60632841)
藤好 真人 北海道大学, 医学研究院, 客員研究員 (90844720)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 肝移植 / 機械灌流 / 虚血再灌流障害 / 脂肪肝 / 心停止ドナー / 重水 / ミトコンドリア / 機能評価 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
肝移植におけるドナー不足は未解決であり、心停止肝や脂肪肝の安全な利用が望まれる。本課題は、1) MPの至適条件、2) MP中の薬物性コンディショニングの効果を明らかにし、それらの試料解析により、3) 移植前グラフト機能評価法の確立を目指して検討した。
SHRSP5-Dmcr ratに高脂肪高コレステロール食を給餌し、脂肪肝を作成し、脂肪化の程度をMRIで評価する方法論を確立した。脂肪肝を新液で冷保存し、再灌流後の肝機能を評価したが、強い保護効果は得られなかった。ラット長時間冷保存肝、冷保存後の心停止肝では、各温度での機械灌流における至適pHを見出した。これらの易障害性肝グラフトに対する機械灌流中に水素ガスを投与すると、血管抵抗が速やかに減弱したが臓器機能の改善には至らなかった。しかし、末梢組織の構築は著明に改善され、肝表面から水素ガスを浸透させることが末梢循環を改善させる制御可能性が示唆された。
各温度で灌流した肝組織は、機械灌流終了時はもとより37℃再灌流後にもミトコンドリアクリステの構造が保たれていた。電子伝達系複合体Ⅰの機能障害で漏出するフラビンモノヌクレオチド (FMN) を低温酸素化灌流の灌流液でHPLC測定すると、灌流液FMN量の増加は再灌流後の胆汁産生障害、ALT漏出 (組織障害)を予測し得るマーカーであった。一方で、同じ蛍光波長で検出されるリボフラビン (RF)、フラビンアデニンジヌクレオチド (FAD) は障害の予測には適さず、HPLCで分離してから蛍光測定することが重要と考えられた。
タンパク質、メタボローム、レドックス・酸化ストレス、オスミウム浸軟SEM、LC-MS/MS (リピドミクス)などの解析条件を確立したので、各温度での機械灌流の至適pHで灌流した肝組織の採取を終え、順次解析を進めており、早期に論文化することを目指している。
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| Research Progress Status |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Presentation] Lysophosphatidylinositol (16:0) as a possible cause of ischemia reperfusion injury.2022
Author(s)
Shibata K, Hayasaka T, Hashimoto S, Umemoto K, Ishikawa T, Sakamoto S, Kato K, Shimada S, Kawamura N, Wakayama K, Kobayashi N, Hama Y, Fukai M, Shimamura T, and Taketomi A.
Organizer
Transplantation Science Symposium Asian Regional Meeting 2022, Kyoto, 26 Sep. 2022
Int'l Joint Research
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[Presentation] 14-3-3 zeta enhanced survival signals in renal tubular cells subjected to simulating hypothermic perfusion.2022
Author(s)
Fukai M, Shibata K, Sakamoto S, Fujiyoshi M, Fujiyoshi S, Nakamura K, Ishikawa T, Kawamura N, Zin MKN, Bochimoto H, Shimamura T, Taketomi A.
Organizer
Transplantation Science Symposium Asian Regional Meeting 2022, Kyoto, 26 Sep. 2022
Int'l Joint Research
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[Presentation] Important components of D2O containing solution for liver cold storage using an isolated perfused rat liver (IPRL)2022
Author(s)
Fukai M, Shibata K, Sakamoto S, Fujiyoshi M, Fujiyoshi S, Nakamura K, Ishikawa T, Kawamura N, Zin MKN, Bochimoto H, Shimamura T, Taketomi A.
Organizer
Transplantation Science Symposium Asian Regional Meeting 2022, Kyoto, 26 Sep. 2022
Int'l Joint Research
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[Presentation] Cold storage in D2O containing solution and post-reperfusion H2 gas treatment reduced rat liver damage: An IPRL study.2022
Author(s)
Fukai M, Shibata K, Sakamoto S, Fujiyoshi M, Fujiyoshi S, Nakamura K, Ishikawa T, Kawamura N, Zin MKN, Bochimoto H, Shimamura T, Taketomi A.
Organizer
Transplantation Science Symposium Asian Regional Meeting 2022, Kyoto, 26 Sep. 2022
Int'l Joint Research
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[Presentation] Hypothermic machine perfusion with H2 gas reduced focal injury in DCD rat liver but failed to restore organ function.2022
Author(s)
Fukai M, Shibata K, Sakamoto S, Fujiyoshi M, Fujiyoshi S, Nakamura K, Ishikawa T, Kawamura N, Zin MKN, Bochimoto H, Shimamura T, Taketomi A.
Organizer
Transplantation Science Symposium Asian Regional Meeting 2022, Kyoto, 26 Sep. 2022
Int'l Joint Research
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[Presentation] Rapid and reliable steatosis rat model (SHRSP5-Dmcr) for cold storage experiments: A preliminary study.2022
Author(s)
Fukai M, Shibata K, Sakamoto S, Fujiyoshi M, Fujiyoshi S, Nakamura K, Takahisa Ishikawa, Kawamura N, Zin MKN, Bochimoto H, Shimamura T, Taketomi A.
Organizer
Transplantation Science Symposium Asian Regional Meeting 2022, Kyoto, 26 Sep. 2022
Int'l Joint Research
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[Presentation] 心停止肝に対する低温機械灌流の至適pHの検討2022
Author(s)
坂本聡大, 柴田賢吾, 石川隆壽, 島田慎吾, 川村典生, 若山顕治, 藤好真人, 渡辺正明, 後藤了一, 巌築慶一, 加藤紘一, 嶋村剛，深井原, 武冨紹信
Organizer
第122回日本外科学会 2022.4.14 (SF-29-6 口演) Hybrid開催 Web 発表
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