2021 Fiscal Year Research-status Report
発がん高感受性モデルマウスを用いたトリチウムの生態影響評価
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20K05386
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Research Institution | University of Occupational and Environmental Health, Japan |
Principal Investigator |
馬田 敏幸 産業医科大学, 教育研究支援施設, 准教授 (30213482)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大津山 彰 産業医科大学, 医学部, 准教授 (10194218)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | トリチウム / 低線量率ひばく / 発がん高感受性モデルマウス / 遺伝子変異 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、発がん高感受性モデルマウス(ApcMin/+マウス)を用いてトリチウムβ線による低線量率被ばくの発がんリスクの評価を目指している。令和3年度はB6-ApcMin/+マウスとC3H野生型マウスのF1マウスを用いて、トリチウム水による3 Gyの被ばく実験を行った。 ApcMin/+マウスは2週齢からの低線量率放射線(γ線)被曝で小腸の発がんが報告されている。そこでトリチウム水暴露実験では、2週齢(体重が6から8グラム)で90MBq(1週間で3 Gyの被曝に相当)のトリチウム水を腹腔内に1回接種し、27週齢まで飼育して小腸腫瘍の発生を調べた。その結果、小腸腫瘍数はトリチウム水投与群が非投与群に比べて有意に増加した。さらに腫瘍の一部からDNAを抽出し、Mitマーカーを用いてLOH解析をおこない、遺伝子変異を調べた。現在のところ、トリチウム被曝による特徴的な遺伝子変異は検出されていない。 トリチウム水投与群と非投与群でマウスの体重に有意差はなかったが、トリチウム水投与群のマウスの脾臓重量が有意に増加した。屠殺直後のマウスの心臓から採血を行い、血球計数装置にてリンパ球数、血小板数およびヘモグロビン値を計測した。その結果、リンパ球数と血小板数にはトリチウム水投与群と非投与群に有意差はなかったが、ヘモグロビン値がトリチウム水投与群で有意に低下した。ヘモグロビン値の低下は、脾腫により脾臓の機能が亢進した状態になり、赤血球の破壊が亢進したためと考えられる。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
低線量率γ線照射装置の不具合が発生し、ApcMin/+マウスの幼若期における照射を実施できなかった。本来ならばトリチウム水接種のマウスのグループと同時並行に行うべきであるが、今後実施の予定である。
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Strategy for Future Research Activity |
本研究は、発がん高感受性モデルマウス(ApcMin/+マウス)を用いてトリチウム水による低線量率ベータ線被曝による小腸腫瘍からDNAを採取し、遺伝子変異解析を行い、発がん機構の解明とリスク評価を行うことが目的である。今後は以下のように研究を進めていく。 1)B6-ApcMin/+マウスとC3H野生型マウスのF1マウスを準備し、1.5Gy被ばくのトリチウム水曝露実験を行う。 2)同時に低線量率ガンマ線照射装置によりシミュレーション照射を行う。 3)腫瘍の一部から細胞を採取し、ゲノムDNAを抽出する。18番染色体の複数のMitマーカーに対するPCRプライマーでDNAフラグメントを増幅し、バイオアナライザーでLOH解析を行う。 4)これらのデータを非照射のグループと比較して、トリチウムに固有の突然変異が生じるかを調査する。
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Causes of Carryover |
コロナ禍のために、トリチウム水の輸入に遅延が発生したために翌年の購入予定となった。また、成果発表の場である学会が現地開催ではなくオンライン開催となったために、旅費の支出がゼロになったため。
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