2021 Fiscal Year Research-status Report
Functional analysis of Hippo pathway in thymus
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20K07572
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
西尾 美希 神戸大学, 医学研究科, 講師 (10467897)
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2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | Hippo経路 / 胸腺 / 腫瘍 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
胸腺は、T細胞の分化・成熟に必須の器官であり、T細胞とそれを取り巻くストローマ細胞により構成される。ストローマ細胞の中では、胸腺上皮細胞がT細胞への抗原提示や分化・成熟に中心的役割を担う。これまで胸腺T細胞研究はかなり進んだが、胸腺上皮細胞の増殖・分化・機能制御は，まだ不明な部分が多い。胸腺上皮細胞が腫瘍化した胸腺癌の多くが進行癌で発見されることから、予後不良の腫瘍であり、希少癌であるがゆえにその原因も未だ殆ど不明であることから、有効な治療法も確立されていない。そこで胸腺上皮細胞におけるHippo経路の役割を明らかにするため、種々のHippo経路分子を胸腺上皮特異的に欠損させたところ、LATSが欠損すると早期に胸腺癌を発症すること、MOB1やYAPの欠損が胸腺のサイズに影響することを見出した。一方で、胸腺関連の腫瘍免疫担当細胞には、CD8+T細胞、Treg細胞、NKT細胞があり、このなかでも腫瘍免疫領域におけるNKT細胞の重要性が報告されてきたが、数が少ない集団のため、解析が困難で、その分化・機能に重要なシグナル経路は十分解明されていなかった。これまでに種々のHippo経路分子を胸腺上皮特異的に欠損させたところ、MSTが欠損すると成熟したiNKT細胞が著しく減少すること、DNA再構成に障害は見られないがmRNA発現が著しく減少すること、サイトカイン産生が減少すること、などを見出した。これらの結果は最近になって報告されたMSTのNKT細胞における機能と一致していた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
胸腺上皮細胞におけるHippo経路の役割を解析するため、Foxn1-Cre Tgマウスを用いて、胸腺上皮特異的LATS欠損マウスを作製したところ、このマウスでは早期に胸腺癌を発症したため、T細胞の分化・成熟において中心的な役割を担う胸腺上皮でのHippo経路の解析が困難となった。そのため、K14-CreERT Tgマウスを用いて、成体になって胸腺上皮特異的にLATSを欠損させるマウスの作製および、腎皮膜下移植の系の検討を始めたが、K14-CreERT Tgマウスを用いると胸腺上皮以外でのLATS欠損の影響で欠損早期に致死となった。このため、現在は腎皮膜下移植の系およびin virtoでの器官培養系で検討を進めている。また、胸腺上皮特異的LATS欠損マウスに発症する癌のYAPあるいはTAZ依存性、胸腺上皮特異的その他のHippo経路分子変異マウスとの比較を行いつつある。
胸腺NKT細胞におけるHippo経路の役割を解析するため、Lck-Cre Tgマウスを用いて、NKT・T細胞特異的MST欠損マウスの作製したところ、他のVαのレパートリー数の変化なしにiNKT細胞だけが著しく減少し、iNKT細胞成熟過程においてstage3でアポーシスが亢進していた。NKT細胞からのIFNやIL4のサイトカイン産生も減少していた。一方で、抗原提示細胞（DP T細胞）の抗原提示能に変化は見られなかった。また、MST欠損iNKT細胞細胞ではVa14/Ja18のDNA再構成障害は見られないものの、Va14/Ja18mRNAの発現量の著しく減少が再現されたことから、転写抑制によることが示唆された。
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| Strategy for Future Research Activity |
胸腺上皮細胞におけるHippo経路の役割に関して、引き続き腎皮膜下移植の系およびin virtoでの器官培養の系を用いてLATS欠損胸腺上皮のT細胞の分化・成熟における影響を検討する。また薬剤誘導性LATS欠損胸腺上皮細胞株を用いて、細胞増殖・分化・未分化性・染色体不安定性変化や接触するT細胞に与える反応性変化の検討を引き続き行う。また、胸腺上皮特異的その他のHippo経路分子欠損マウスとの比較に加えて、胸腺上皮特異的に活性型YAPを発現するTgマウスの解析を開始する。
胸腺NKT細胞におけるHippo経路の役割に関しては、MSTとその他のHippo経路分子とのNKT細胞の表現型を比較する。
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| Causes of Carryover |
予定していたマイクロアレイ解析の一部を延期したためと
コロナ感染症の影響による、抗体などの消耗品の入荷遅れや学会などの情報収集を控えたため。
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[Journal Article] Alantolactone is a natural product that potently inhibits YAP1/TAZ through promotion of reactive oxygen species accumulation.2021
Author(s)
Keisuke Nakatani , Tomohiko Maehama , Miki Nishio , Junji Otani , Keiko Yamaguchi , Miki Fukumoto , Hiroki Hikasa , Shinji Hagiwara , Hiroshi Nishina , Tak Wah Mak , Teruki Honma , Yasumitsu Kondoh , Hiroyuki Osada , Minoru Yoshida , Akira Suzuki
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Journal Title
Cancer science
Volume: 112
Pages: 4303-4316
DOI
Peer Reviewed
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