2020 Fiscal Year Research-status Report
The Protective Role of Trained Immunity against Lethal Sepsis in Neonatal Mice
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20K08229
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
藤岡 一路 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (20568810)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 新生児敗血症 / Trained immunity / 自然免疫 / 糞便懸濁液投与法 / 新生児敗血症モデルマウス / Exosome / Trained immunity誘導法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、少量のLPS等に暴露することで自然免疫系を活性化させ、感染防御効果を誘導するTrained Immunity(TI)の概念が注目されている。一方、免疫応答が未熟な新生児敗血症においてはTIの効果は明らかではない。
本研究の目的は、非致死量の糞便懸濁液（Cecal slurry, CS）を予め投与してTIを誘導した新生仔マウスに致死的敗血症を誘導して、TIの保護効果を検討すること。
本年度はまず、成獣マウスから摘出した虫垂内容物を15%glycerol-PBSに溶解してCS（100mg/mL）を作成し、－80℃で保存した。予備的検討で、異なる用量（0.5, 1.0, 1.5, 2.0mg/g）のCS保存液を腹腔内投与した場合の7日齢マウスの死亡率は、各々0, 61, 83, 100%であったことから、日齢3に0.5mg/g CS（非致死量,TI群）または生食(Veh群)を前投与し、72時間後（7日齢）にCS 1.5mg/g(LD83)を投与し、敗血症誘導6時間後の肝臓免疫関連遺伝子発現、9時間後の肝臓酸化ストレスおよび血中細菌数、7日間生存率を検討した。
結果は、2群間において肝臓酸化ストレス（TI:74.6±16.1 vs. Veh:63.4±13.0 U.CARR, p=0.26）に差を認めない一方、TI群において血中細菌数が有意に低値であった（TI:1.7±2.0x103 vs. Veh:2.6±0.6x104 CFU/ml, p＜0.05）。また、TI群において7日間生存率（TI:94% vs. Veh:10%, p＜0.05, 各群n≧10）が有意に改善した。
TI群において明らかな生存率の改善を認めたことから、本モデルにおいてもTIの敗血症保護効果を確認することができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID-19 pandemicの影響で、動物舎および実験室への立ち入り制限期間が生じたため、一時的に研究活動が停滞した。2021年に入り、当初の研究計画に則り研究を再開している。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は、本モデルにおけるTIの病態生理の解明を目指して、a) 臓器障害の検討、b) 網羅的遺伝子発現の解析、c) 細胞表面マーカーの解析、d) 腹腔マクロファージのエピゲノム変化の検討、に取り組む予定である。
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| Causes of Carryover |
COVID-19 pandemicの影響により、動物実験の実施が一時的に停滞した。
また、参加予定であった学会が中止、延期となった。
研究活動が積極的に再開できる状態となれば、当初の計画に則り支出する予定である。
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