2020 Fiscal Year Research-status Report
Development of tailor-made iPS-DC cancer vaccine therapy targeting Neoantigen
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20K09063
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
尾島 敏康 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60448785)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190)
北谷 純也 和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助教 (30596979)
中村 公紀 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (80364090)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 樹状細胞 / がんワクチン / Neoantigen |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度はB16マウスを用いた動物実験を行った。具体的にはB16メラノーマ細胞のtotal mRNAを抽出し，Ｃ57ＢＬマウス由来iPS細胞より分化誘導した樹状細胞(DC)に遺伝子導入した。このiPS-DCがメラノーマに対して，特異的な細胞傷害性Tリンパ球が誘導可能か否かを検討した。具体的な研究内容は以下である。B16を拡大培養し，TRIzol RNA Isolation Reagent（Invitrogen）を用いて，total RNAを分離．さらに，Dynabeads mRNA Purification Kit（Life technologies）を用いて，total RNAからmRNAを精製した。iPS-DC分化誘導はこれまでの4step法を用いた．分化誘導したiPS-DC，およびナイーブなBMDCに，B16 mRNA transfectionを行った．mRNAの導入効率については，B16のTAAであるgp100をFACSで解析することで比較検討を行い至適mRNA量は50μlであった．続いてマウスワクチン研究を行った。iPS-DC-tumor mRNA，BMDC-tumor mRNAの作成を行った後に，各DC (各群n=10) をマウス背部皮下に接種し14日後にマウス脾臓を採取した．脾臓よりCD8+リンパ球を採取し，B16 cell lineと供培養することでCTLを誘導．CTLの細胞傷害活性をB16 を用いた51Cr-release assayにて測定した．現在マウスの背部皮下にB16を接種し，5日後に，大腿部皮下にiPS-DC-mRNA群，BM-DC-mRNA群にわけて接種し (各群n=10)． mouse皮下腫瘍体積を経時的に計測し，そのin vivoワクチン効果の比較検討を行っている．現時点で作業仮説どおりiPS-DC-mRNAワクチンはナイーブなBMDC-mRNAとのワクチン効果は変わらない結果を得ている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
2020年度はマウス研究を主におこなったが，すべての研究パートで作業仮説どおりの結果が得られた。2021年度は予定通りhumanの腫瘍細胞より検索したneoantigenをtargetとした研究が開始となる。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在行っているマウスのワクチン実験が終了したら予定通りhuman腫瘍細胞を用いた本丸の実験が開始となる。当大学病院で治療を行う消化器固形癌患者を対象に，研究者から本研究内容を説明し，研究参加の同意を得ている．手術症例を対象とし，術中に切除された組織から大腸癌組織を採取し、その組織を酵素処理し，CTOS法を用いた3次元培養を行うことで癌組織のcell line化を行っている．すでに研究はスタートしており，大腸癌患者よりCTOS法を用いた腫瘍のcell line化に成功している．引き続き効率よく研究を推進していく予定である。
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Research Products
(13 results)
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[Journal Article] Safety and feasibility of laparoscopic gastrectomy for remnant gastric cancer compared with open gastrectomy: Single-center experience.2021
Author(s)
Kitadani J, Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Katsuda M, Takeuchi A, Tominaga S, Fukuda N, Motobayashi H, Nakai T, Yamaue H.
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Journal Title
Medicine (Baltimore).
Volume: 100
Pages: e23932.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Postoperative atrial fibrillation does not impact on overall survival after esophagectomy in patients with thoracic esophageal cancer: results from a randomized, double-blind, placebo-controlled trial.2020
Author(s)
Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Kitadani J, Katsuda M, Nakamori M, Takeuchi A, Maruoka S, Fukuda N, Tominaga S, Motobayashi H, Yamaue H.
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Journal Title
Oncotarget.
Volume: 11
Pages: 2414-2423.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Anticancer effects of chemokine-directed antigen delivery to a cross-presenting dendritic cell subset with immune checkpoint blockade.2020
Author(s)
Mizumoto Y, Hemmi H, Katsuda M, Miyazawa M, Kitahata Y, Miyamoto A, Nakamori M, Ojima T, Matsuda K, Nakamura M, Hayata K, Fukuda-Ohta Y, Sugiyama M, Ohta T, Orimo T, Okura S, Sasaki I, Tamada K, Yamaue H, Kaisho T.
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Journal Title
Br J Cancer.
Volume: 122
Pages: 1185-1193.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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