A Study on Signal Transductions of MSC Culture in Total Autologous Angiogenic Therapy

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K09133
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 福田 尚司 東京医科大学, 医学部, 教授 (70362069)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 落谷 孝広 東京医科大学, 医学部, 教授 (60192530)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: エクソソーム / 血管新生 / 間葉系細胞

Outline of Annual Research Achievements

【実験条件の確立】①間葉系細胞培養上清回収の条件確立、②エクソソーム測定に適した間葉系細胞培養培地の決定、③培養上清からエクソソーム精製の至適条件確立、④精製されたエクソソームからRNA抽出条件の確立、⑤マトリジェルを用いたHUVEC培養条件の確立
【実験方法の確立】①精製した培養上清中の粒子数測定の妥当性確認、②同上上清中のエクソソーム数測定の妥当性確認、③血管新生関連マイクロRNAに関するRNA抽出および定量的PCRの妥当性確認、④マトリジェルを用いたHUVEC培養の妥当性の確認
【対象】若年者および老年者の間葉系細胞培養上清
【結果】上清中の粒子数、エクソソーム数の確認により、血管新生関連マイクロRNA（miR-9、miR-105、miR-126、miR-135、miR-210）の有無について明らかにした。
また、同マイクロRNAに関し、世代による差についての定量結果を得た。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

初年度は、養上清中に含まれるエクソソームの量が、想定していたより少なく、定量評価するためには大量の上清を要したため予定より遅れてしまったが、令和3年度は前年度の結果がうまく利用できたため、遅れを取り戻すことができた。

Strategy for Future Research Activity

同定されたエクソソームを用い、in-vitroで血管新生への影響を検証する。

Causes of Carryover

コロナ禍の影響で学会出張が無かったため。