A Study on Signal Transductions of MSC Culture in Total Autologous Angiogenic Therapy

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K09133
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 福田 尚司 東京医科大学, 医学部, 教授 (70362069)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 落谷 孝広 東京医科大学, 医学部, 教授 (60192530)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: エクソソーム / 血管新生 / 間葉系細胞

Outline of Annual Research Achievements

【実験条件の確立】①間葉系細胞培養上清回収の条件確立、②エクソソーム測定に適した間葉系細胞培養培地の決定、③培養上清からエクソソーム精製の至適条件確立、④精製されたエクソソームからRNA抽出条件の確立、⑤マトリジェルを用いたHUVEC培養条件の確立
【実験方法の確立】①精製した培養上清中の粒子数測定の妥当性確認、②同上上清中のエクソソーム数測定の妥当性確認、③血管新生関連マイクロRNAに関するRNA抽出および定量的PCRの妥当性確認、④マトリジェルを用いたHUVEC培養の妥当性の確認
【対象】若年者および老年者の間葉系細胞培養上清
【結果】①上清中の粒子数、エクソソーム数の確認により、血管新生関連マイクロRNA（miR-9、miR-105、miR-126、miR-135、miR-210）の有無について明らかにした。②MSC培養上清中に発現しているmiR-A、miR-B、miR-CをHUVECに導入できることをPCRにて確認した。
【期間延長して明らかにしたい点】該当したmiRを導入したHUVECを培養し、導入したmiRに関する血管新生強度の差について明らかにする。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

国際情勢の影響で試薬の入手に時間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

miRを導入したHUVECを培養し、導入したmiRに関する血管新生強度の差にについて明らかにする。

Causes of Carryover

国際情勢により試薬の入手が困難であり、研究が遅延してしまったため次年度の使用が生じた。2023年度4月時点で入荷が遅延していた試薬の入荷の目途が立ったため、同年度内に研究が完遂する見込みである。