2023 Fiscal Year Annual Research Report
A Study on Signal Transductions of MSC Culture in Total Autologous Angiogenic Therapy
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20K09133
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| Research Institution | Tokyo Medical University |
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Principal Investigator |
福田 尚司 東京医科大学, 医学部, 教授 (70362069)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
落谷 孝広 東京医科大学, 医学部, 特任教授 (60192530)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | エクソソーム / 血管新生 / 間葉系細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【最終年度に達成した成果】①MSCにレンチウイルスベクターを用いｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１３５、ｍｉＲ－２１０の強発現を確認した。②同MSCの培養上清から超遠心法でエクソソームを回収し、マトリジェルを用いたHUVEC培養にてその効果を確認した。③特異的エクソソームがMSCが存在しなくても血管新生効果を発現するため、血管新生効果を有した物質として特許出願した。
【実験条件の確立】（令和２ー３年度で達成）①間葉系細胞培養上清回収の条件を確立した。②エクソソーム測定に適した間葉系細胞培養培地の決定した。③培養上清からエクソソーム精製の至適条件確立した。④精製されたエクソソームからＲＮＡ抽出条件の確立した。⑤マトリジェルを用いたＨＵＶＥＣ培養条件の確立した。⑥血管新生効果を有するマイクロＲＮＡを同定した。
【実験方法の確立】（令和４年度で達成）①精製した培養上清中の粒子数測定の妥当性確認した。②同上上清中のエクソソーム数測定の妥当性確認した。③血管新生関連マイクロＲＮＡに関するＲＮＡ抽出および定量的ＰＣＲの妥当性確認した。④マトリジェルを用いたＨＵＶＥＣ培養の妥当性の確認した。⑤同定した血管新生マイクロＲＮＡの血管新生効果のについて確認した。
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