転移性骨・脊椎腫瘍に対する局所凍結療法のがん特異的免疫増強効果の検証

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K09431
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 加藤 仁志 金沢大学, 附属病院, 助教 (30584841)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 転移性骨腫瘍 / 凍結療法 / 免疫増強

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、転移性骨腫瘍モデルマウスを用いて、生体内の局所凍結療法によるがん特異的免疫増強効果(Abscopal効果)を検証し、免疫チェックポイント阻害剤(抗PD-1抗体)による相加・相乗効果の有無を検証した。
C3H/HeSlcマウスの両側脛骨にマウス乳癌細胞を植え込み、骨転移モデルを作成した。左側腫瘍は局所治療としてCryoablation: CAを施行し（Cryoablation tumor: CT）、右側腫瘍は未治療としてAbscopal効果を評価した（Abscopal tumor: AT）。治療介入として、CAと、抗PD-1抗体腹腔内投与（PD）の2種類を行い、それらの組み合わせにより4群に分けた（Control群、CA群、PD群、CA＋PD群、各群n=8）。ATの経時的な腫瘍サイズ縮小率および免疫染色を用いた免疫関連細胞浸潤の強度を比較検討し、各群でAbscopal効果の評価を行った。
Cryoablationから7日目の腫瘍サイズ変化率の平均値は、CA群 20.5%、Control群 30.6%、7日目から14日目においては、CA群 －25.2%、Control群 41.3%とCA群において縮小傾向を認めた。さらに、CA+PD群は、予定のサンプル数に到達していないが、途中経過において遠隔腫瘍縮小の相乗効果が認められ、今後サンプル数を増やし統計解析する予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

遠隔腫瘍の縮小効果を示すことができ、CAによる遠隔部への抗腫瘍効果が示唆されたため。また、実臨床を想定した抗PD-1抗体との併用による抗腫瘍効果の相乗効果が示唆されたため。

Strategy for Future Research Activity

また、これまでの研究で示した抗腫瘍効果に加え、遠隔腫瘍の免疫組織学的評価と免疫アッセイを行うことで腫瘍特異的免疫上昇効果を示したい。
免疫組織学的評価として、遠隔腫瘍に対するCD4、CD8、FoxP3、Ki-67陽性細胞の浸潤傾向を調べる。さらに、免疫アッセイとして、ELISPOT assayを用いて腫瘍特異的INF-γ産生Tリンパ球の検出を行い各群で検出数を比較する。

Causes of Carryover

理由：令和2年度は効率的な予算の執行を行った。購入予定であった実験用マウスの一次的な在庫不足により次年度に繰り越しとなったため、187,348円が未使用額となった。

使用計画：今後、さらに検体数を増やす予定であるため、実験用マウスの購入費用として使用する予定である。