2020 Fiscal Year Research-status Report
歯肉溝滲出液中エクソソームを用いたリキッドバイオプシーの可能性
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20K10083
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| Research Institution | Osaka Dental University |
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Principal Investigator |
川本 章代 大阪歯科大学, 歯学部, 准教授 (50368156)
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2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | miRNA / 歯肉溝滲出液 / エクソソーム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯肉溝滲出液はPERIOPAPERにて採取を行った。血液が付着したものは含めないものとした。歯肉溝滲出液中のエクソソームの存在を確認するために、粒子径測定をELSA-２０００ZSとNANOSIGHTにて、エクソソーム膜表面に存在するCD9/CD63をサンドイッチELISAにて、またエクソソームの観察を透過型電子顕微鏡（TEM）にて実施した。
その結果,エクソソームの粒子径は30から150nmと言われているが、今回の粒子径測定の結果よりエクソソームの存在を示す100nm前後にピーク波形を確認することができた。また、サンドイッチELISAよりCD9/CD63が検出された。TEM観察よりエクソソームを示す球形が確認できた。
糖尿病患者は歯周病に罹患している場合が多く、まずは慢性歯周病患者と健常成人とを比較検討した。歯肉溝滲出液中エクソソームから全RNAを抽出し、逆転写した後に３D-Gene（東レ株式会社）を用いて網羅的にmiRNA発現解析を行った。
網羅的解析より、健常成人と比較して慢性歯周病患者のmiRNA発現に８倍以上差がみられたのは１１種であった。今後、被験者として糖尿病罹患者をリクルートし、歯肉溝滲出液の採取を試みる予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
コロナ渦で患者数の減少に伴い、十分な被験者のリクルートがスムーズではないため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、糖尿病罹患患者のリクルートを行い、試料採取と並行して分析を行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
試料採取のためのペーパー、ならびにその後の分析のために今後使用していく予定であるが、初年度の試料採取人数がコロナ渦のため少なく、余ったものと思われる。次年度も引き続き使用していく予定である。
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