2021 Fiscal Year Research-status Report
悪性黒色腫の増殖・浸潤・転移における細胞骨格制御因子Plectinの役割
| Project/Area Number |
20K10185
|
|---|
| Research Institution | Kyushu Dental College |
|---|
Principal Investigator |
吉岡 泉 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (10305823)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松原 琢磨 九州歯科大学, 歯学部, 准教授 (00423137)
矢田 直美 九州歯科大学, 歯学部, 准教授 (60468022)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| Keywords | 悪性黒色腫 / Src / Plectin |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
【目的】悪性黒色腫は皮膚や口腔を含む粘膜に発症するがん（悪性腫瘍）であり，早期より全身転移するため予後が悪い．がん遺伝子Srcは細胞増殖，移動および接着の制御し，悪声黒色腫を含む様々ながん細胞の浸潤や転移を促進するが，正常細胞の様々な生命現象にも関与している。近年，我々はがんの増悪に関連する可能性が指摘されているplectinをSrc結合分子として見出した。そこで本研究では悪性黒色腫におけるplectinの機能を検討した。
【方法】CRISPR/Cas9システムを用いてplectin遺伝子が欠損したマウス悪性黒色腫細胞株B16細胞（PKO）を作製した。ヌードマウスにPKOを接種し2週間後形成された腫瘍を形態学・組織学的に解析した。Hanging Drop 法により形成したスフェロイドを形態学的に評価した。PKOの細胞増殖能をWST８法およびリアルタイムPCRで，細胞接着能をフィブロネクチンコーティングした培養皿に細胞播種し，2時間後に非接着細胞を洗い流すことにより検討した。Western botting法と免疫沈降法によりPKOがSrcシグナル活性に与える影響を評価した。
【結果】マウスに形成された腫瘍の大きさはコントロールとPKOで差はなかったが，PKOの腫瘍の密度は低く，細胞間隙の拡大を認めた。同様にPKOのスフェロイドは凝集密度が低下した。またPKOでは，CyclinD1の発現量の低下と細胞数の減少が認められた。さらにPKOの接着能も低下した。PKOではSrc活性が低下しており，PKOにSrcを過剰発現したところ，細胞増殖と接着能の回復を認めた。
【考察】plectinはSrcを活性化して悪性黒色腫の増殖，接着を制御する。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究は完成し，論文投稿が済んでいるため（現在リバイス中）．
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後，適切にリバイス研究を行い，期間内に確実に論文が掲載されることを目指す．
|
| Causes of Carryover |
COVID-19の影響で現地開催の学会がなくなり，予定より旅費の支出がなくなったため．
|
