2021 Fiscal Year Research-status Report
Role of hepatic lipase and endogenous lipase inhibitors during onset of combined hyperlipidemia
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20K11621
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
稲津 明広 金沢大学, 保健学系, 教授 (80293348)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | トリグリセリド / LPL / ANGPTL3 / ANGPTL4 / ANGPTL8 / 内因性インヒビター / 脂肪細胞 / 複合型高脂血症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
家族性複合型高脂血症 (FCHL, familial combined hyperlipidemia) は家系内に超低比重リポ蛋白（Very Low Density Lipoprotein, VLDL)と低比重リポ蛋白（Low Density Lipoprotein, LDL)が増加する病態であるが,表現型( IIa, IIb, IV) が家系内で多様であること，また個人内で表現型が変動することが特徴である．その成因についてインスリン抵抗性やトリアシルグリセロール (TG) 代謝異常が推定されるが，遺伝子レベルでは十分に解明されていない.
今年度はアンジオポエチン様タンパク質（Angiopoietin-like protein 8, ANGPTL 8) はLipoprotein lipase (LPL) の阻害因子であり, ANGPTL 3やANGPTL 4と複合体を形成することでLPL阻害活性を調節し, 血管内皮でのLPL活性と脂肪細胞でのTG代謝調節に関与している.
ANGPTL 8の多型であるR59W (c.175 C>T rs2278426) は日本人で頻度が高く, 血清脂質パラメータや2型糖尿病, 耐糖能異常との関連性が報告され，R59Wのホモ接合型ではTGが低下するが，LPL活性に及ぼす影響は不明である．そこで, 本研究ではin vitroでANGPTL 8 R59Wの活性を評価するために, 大腸菌発現系を用いてANGPTL 8野生型, R59W変異型の精製を行い, 合わせてANGPTL 3の発現条件を検討し，ANGPTL 8多型とANGPTL 3との複合体を過剰発現させる至適条件を導き出す予備実験を行った．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ANGPTL 8野生型, R59W変異型は大腸菌発現系を用いると, 封入体を形成して不溶化する性質を持つことが分かった. 従って, 変性剤で可溶化してNiアフィニティクロマトグラフィーを行うことで精製に成功した. さらに，ANGPTL 3を精製する必要がある．
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| Strategy for Future Research Activity |
ANGPTL 3の発現条件を検討し，ANGPTL 3とANGPTL 8との複合体を作成してLPL活性への影響をin vitroで検討する予定である．また，動物細胞を用いた発現ベクターの一過性発現系での検討を追加する．さらに，ANGPTL 3／8の肝性リパーゼ活性に対する影響をin vitroで検討する．
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| Causes of Carryover |
チップなど消耗品費の納入に遅れがあり，次年度へ移行することとした．
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[Journal Article] A teenager boy with a novel variant of Sitosterolemia presented with pancytopenia2022
Author(s)
Veysel Gok, Hayato Tada, Muhammet Ensar Dogan, Ummu Alakus Sari, Kubra Aslan, Alper Ozcan, Ebru Yilmaz, Fatih Kardas, Musa Karakukcu, Halit Canatan, Cigdem Karakukcu, Munis Dundar, Akihiro Inazu, Ekrem Unal
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Journal Title
Clin Chim Acta
Volume: 529
Pages: 61-66
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
