老化関連分泌因子誘発肝がんの分子機序解析

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K16967
• Research Institution: Osaka City University
• Principal Investigator: 小田桐 直志 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 病院講師 (10623241)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 肝星細胞 / 細胞老化 / 老化関連分泌表現型

Outline of Annual Research Achievements

我々はヒト肝星細胞を用いたこれまでの基礎的研究から、老化肝星細胞から分泌される因子としてInterleukin-8（IL-8）、Angiopoietin-like 4（ANGPTL4）、Platelet Factor 4 Variant 1（PF4V1）を特定し、これらを「老化3因子」と命名した。この老化3因子が肝微小環境に与える影響を調べることで、肝星細胞の細胞老化とその生理的影響の解明を目指すことを目的としている。
まず、老化3因子の発現系の構築に着手した。先行してPF4V1発現プラスミドが構築され、ヒト胎児腎細胞293（HEK293）細胞に導入すると細胞内・メディウム中ともにPF4V1の発現が確認された。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

本年度は世界的な新型コロナウイルス感染症の影響で物品調達や実験スケジュールに大きな狂いが生じ、実験が進まない状態が続いた。また、PF4V1の発現系構築にも時間を要した。

Strategy for Future Research Activity

1)PF4V1の機能解析
構築したPF4V1の発現系を用い、肝細胞（HepG2、HuH-7、マウス肝細胞など）、肝星細胞（HHSteC、LX-2、マウス肝星細胞）、内皮細胞（HUVEC）などにおけるPF4V1の機能解析を行う。
2)ANGPTL4の機能解析
ANGPTL4についても発現系の構築を目指し、PF4V1と同様に機能解析を行う。
3)in vivoにおける検証
ヌードマウスを用い、老化ヒト肝星細胞と肝癌細胞との共培養を行うことで肝癌細胞増殖に与える影響を確認し、老化肝星細胞の肝癌進展への作用を調べる。

Causes of Carryover

本年度は世界的な新型コロナウイルス感染症の影響で物品調達や実験スケジュールに大きな狂いが生じ、実験が進まない状態が続いた。PF4V1の機能解析を進めるとともに、ANGPTL4の発現系構築方法を再検討し、機能解析につなげたいと考える。

Research Products

• [Presentation] EARLY CHANGE IN THE PLASMA LEVELS OF CIRCULATING SOLUBLE IMMUNE CHECKPOINT PROTEINS IN ATIENTS WITH UNRESECTABLE HEPATOCELLULAR CARCINOMA TREATED BY LENVATINIB OR TRANSCATHETER ARTERIAL HEMOEMBOLIZATION (2020)
  • Author(s): Odagiri, N; Enomoto, M; Hai, H; Le, TTT;Dong, MP; Suoh, M; Kotani, K; Hagihara,A; Uchida, S; Tamori, A; Kawada, N
  • Organizer: AASLD The Liver Meeting
  • Int'l Joint Research