2019 Fiscal Year Annual Research Report
滑膜の細胞間ネットワークから紐解く関節の制御システムの全貌
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19H05565
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
田中 栄 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (50282661)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 琢 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (30456107)
岡田 慶太 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (50759173)
千々松 良太 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (60803210)
森 大典 東京大学, 医学部附属病院, 特任研究員 (60835354)
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| Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2022-03-31
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| Keywords | 整形外科学 / 関節軟骨 / 滑膜 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は関節恒常性・関節疾患の中心を滑膜と捉え、マウスおよびヒト臨床検体を用
いた多様な解析手法とシングルセル解析、NGS解析、微小領域発現解析などの最新の分子生
物学的手法を融合させ、関節の制御システムとしての滑膜の役割を特に細胞間コミュニケーションから解明する計画である。初年度は、マウスの関節発生期や、関節に過剰な力学的負荷をかける変形性関節症モデル、関節の動きを抑制した関節固定モデルにおいて組織切片を経時的に作成し、各細胞のマーカーの免疫組織化学染色を行い、どの時期にどのような細胞が滑膜のどの部位に集積するかを解析した。また次年度以降のシングルセル解析の準備として、マウス滑膜から細胞を単離し、CD90、CD45、CD31、Podoplanin、F4/80などのマーカーの抗体を用いてフローサイトメトリーを行い、各細胞群の組成を把握した。またバルクで滑膜、関節軟骨からRNAを回収し、RNAシーケンスを行って発現遺伝子のデータを得た。また人工関節置換術の際に得られる滑膜組織、軟骨組織を入手し、組織切片を作成して免疫組織化学染色を行うとともに、滑膜組織、軟骨組織から細胞を単離し、上記と同様にCD90、CD45、CD31、Podoplanin、F4/80などのマーカーの抗体を用いてフローサイトメトリーを行い、各細胞群の組成を把握した。またヒトでも同様にバルクで滑膜、関節軟骨からRNAを回収し、RNAシーケンスを行って発現遺伝子のデータを得た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
マウスでは複数モデルで滑膜、軟骨の解析が進められており、ヒトでも手術サンプルで順調に解析できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は基礎検討の結果を踏まえ、マウスの複数のモデル、ヒト手術サンプルを用いて滑膜のシングルセル解析を行い、それぞれの状況におけるサブセットの変化を解明していく。
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