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2023 Fiscal Year Research-status Report

Pioneering chondroneutrigenomics research and its development into chondroneutrigenetics

Research Project

Project/Area Number 20K20611
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

滝川 正春  岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (20112063)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 青山 絵理子  岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (10432650)
星島 光博  岡山大学, 歯学部, 客員研究員 (30736567)
久保田 聡  岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (90221936)
西田 崇  岡山大学, 医歯薬学域, 准教授 (30322233)
江口 傑徳  岡山大学, 医歯薬学域, 講師 (20457229)
Project Period (FY) 2020-07-30 – 2025-03-31
Keywords軟骨 / S-アデノシルメチオニン / CCN2 / ODC / ポリアミン / アグリカン / II型コラーゲン / 遺伝子発現
Outline of Annual Research Achievements

アミノ酸代謝産物s-アデノシルメチオニン(SAM)がヒト軟骨細胞様細胞株HCS-2/8細胞において、CCN2、SOX9、2型コラーゲン、アグリカン、コンドロイチン合成酵素chsy1とchsy2の遺伝子発現を亢進し、アグリカンの蓄積を促進すること、また、オルニチン脱炭酸酵素(ODC)の遺伝子発現を促進することを確認し、さらに、ポリアミンレベルも上昇させることをHPLCにより確かめた。また、SAMのアグリカン蓄積増強作用がSAM合成酵素であるMAT2aの阻害剤PF9366で阻害されること、ポリアミン合成材料となる脱炭酸SAMをSAMから合成する酵素AMD1の阻害剤Sardomozideで阻害されること、さらに、ODCの阻害剤αDFMOでも阻害されることを新規に解明または再確認した。ポリアミンが軟骨細胞の分化を促進することを我々は以前に報告しているが、このことからSAMは単なるポリアミン合成の材料源になるだけでなく、種々の軟骨分化関連因子の遺伝子発現を促進することによって軟骨分化機能を亢進させることが明白となった。さらに、これらの知見をラット骨肉腫由来の軟骨細胞様細胞株RCS細胞でも確認した。また、軟骨前駆細胞株ATDC5をITSの存在下で成長軟骨細胞へ分化させる培養系でSAMはSox9、 2型コラーゲン、アグリカンの遺伝子発現を促進するだけでなく、石灰化も促進する予備的知見も得た。即ち、本研究成果はコンドロニュートリゲノミクス研究の重要な一例となった。コンドロニュートリジェネティクス研究では、昨年度CCN2が関節軟骨形成因子GDF5と結合するだけでなく、BMPRIIおよびBMPR1αとβとも結合することを解明したので、GDF5とCCN2の結合が軟骨細胞分化に与える影響を検討したところ、軟骨分化の程度に依存したcontext-dependentな作用を示す可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

コンドロニュートリゲノミクス研究:これまで、アミノ酸代謝産物s-アデノシルメチオニン(SAM)が軟骨細胞の分化機能発現に重要な働きを示すそのメカニズムとして、SAMが単に軟骨分化促進作用を有するポリアミンの合成の材料源となるだけでなく、ポリアミン合成の律速酵素であるオルニチン脱炭酸酵素(ODC)、軟骨分化促進因子CCN2、軟骨2大分化マーカであるアグリカンやII型コラーゲン等の各種軟骨分化関連遺伝子の遺伝子発現を促進することにより軟骨分化を促進することを明らかにし、コンドロニュートリゲノミクス研究の重要な一例となることを明らかにして、国際誌に発表することが出来た。しかし、上記の経路のクロストークの状況や遺伝子発現の詳細なメカニズムは未だ解明できていない。コンドロニュートリジェネティクス関連ではCCN2とGDF5の結合が、培養細胞では軟骨分化の時期によるcontext-dependentな相乗作用を発揮している可能性を示唆する予備的結果は得られたものの、軟骨の発生・分化・成長の如何なる局面で如何なる作用を発揮するかを未だ解明できていない。
その最大の要因は、新型コロナ感染が拡大し始めた頃に、本研究課題が採択され、当初の3年間がコロナ禍にあったことがある。この間、実験時間の制約、臨床系講座の大学院生の病院への動員によるマンパワーの減少、物流トラブルによる試薬等の納入時期の遅延、外注環境の悪化等で研究の進行が大きく妨げられた。また、もう一つ、コロナ禍真っ最中のR3年度からコロナ禍からの回復期であるR5年度末までの3年間、研究代表者と分担者・大学院生が本来は常駐すべき歯学部棟が改修工事のため、複数の避難場所に実験室や居室がバラバラに散らばり、極めて不自由な実験環境におかれたことが、コロナ被害を大きくし、コロナ禍後の回復をも大きく遅延させたことがあげられる。

Strategy for Future Research Activity

1.コンドロニュートリゲノミクス研究: コンドロニュートリゲノミクスの一例として、R5年度にアミノ酸代謝産物SAMの軟骨分化機能亢進作用の作用メカニズムとして、SAMが軟骨分化促進作用のあるポリアミンの材料源になるだけでなく、各種軟骨分化関連遺伝子の遺伝子発現を誘導すること、即ち情報伝達分子として機能することを明らかにして、国際雑誌に発表した。今後は、どの遺伝子の発現亢進がどの遺伝子の発現を誘発するかなどそのカスケードを明らかにすると共に、その分子メカニスム、特にメチル化との関連を調べる。また、軟骨内SAMレベルを上昇させる栄養・代謝物や機能分子を探索する。さらに、アミノ酸代謝産物だけでなく糖質及び脂質代謝物に関しても、CCN2等の軟骨成長因子・分化マーカーの遺伝子発現に対する影響を調ベ、軟骨ニュートリゲノミクスの研究成果例を3大栄養素にまで拡げ、新研究領域コンドロニュートリゲノミクスをさらに開拓する。
2.コンドロニュートリジェネティクス: R5年度は、GDF5とCCN2の結合が軟骨細胞の増殖・分化に与える影響について、細胞の分化時期によるcontext-dependentな作用を発揮している可能性を示唆するデータを得た。そこで、軟骨細胞株HCS-2/8細胞やRCS細胞だけでなく、軟骨前駆細胞株ADTDC5、未分化間葉系細胞株C3H10T1/2を用いて軟骨発生初期から軟骨分化後期までの広範囲の分化過程を再現できる実験系を用いて両者の結合による軟骨細胞に対する作用を調べる。次いで、マウスの発生時期で両者が共局在する時期を解明して、培養系だけでなく、真にin vivoで発揮される作用が軟骨形成促進作用であることを示す。次いで、変形性関節症モデルマウス(GDF5ヘテロ欠損マウス)等の軟骨疾患マウスモデルを用いて、コンドロニュートリジェネティクス研究の端緒を拓く一例とする。

Causes of Carryover

新型コロナ感染症は、R5年度のゴールデンウィーク後にインフルエンザ並みの第1類に分類され、行動制限も緩和されるようになり、漸く夏頃から学会活動も徐々に回復し始め、それに伴い研究活動も回復はしてきた。しかし、研究代表者や分担者が所属する岡山大学学術研究院医歯薬学域(歯学系)はその中心的研究施設である歯学部棟の改修がR3年度から3年間続き、R5年度末に漸く改修後の建物に帰ることができた。この間、研究代表者の居室や分担者・大学院生の居室、実験室等はキャンパス内の間借り建物に散在しており、研究打ち合わせ等の重要な議論も思うに任せず不自由な研究環境が続いた。コロナ禍での、実験時間の制約、マンパワーの減少、物流のトラブルによる試薬等の納入時期の遅延などは、R5年に入り漸く少しずつ緩和され、R5年度には漸く当初の研究計画にあった新規実験に着手し始めた。しかし、R5年度末までは今度は改修工事の影響で、当初の計画からの遅れを取り戻すほどの研究活動の本格的な回復はできなかった。従って、当然のことながらこれらの新規実験等に必要な試薬等の消耗品は次年度であるR6年度に必要となる。また、高額な費用を要するメタボローム解析(外注)はその受注環境は改善してきたが、上記の2つの理由が重なって何を標的とするかの絞り込みの段階で遅延が生じたため、R6年度に行うことになるのでその費用も必要となる。

  • Research Products

    (32 results)

All 2024 2023 Other

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 4 results) Presentation (27 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Positive Regulation of S-Adenosylmethionine on Chondrocytic Differentiation via Stimulation of Polyamine Production and the Gene Expression of Chondrogenic Differentiation Factors2023

    • Author(s)
      Hoang Loc Dinh、Aoyama Eriko、Hiasa Miki、Omote Hiroshi、Kubota Satoshi、Kuboki Takuo、Takigawa Masaharu
    • Journal Title

      International Journal of Molecular Sciences

      Volume: 24 Pages: 17294~17294

    • DOI

      10.3390/ijms242417294

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Expression and function of CCN2-derived circRNAs in chondrocytes2023

    • Author(s)
      Kato Soma、Kawata Kazumi、Nishida Takashi、Mizukawa Tomomi、Takigawa Masaharu、Iida Seiji、Kubota Satoshi
    • Journal Title

      Journal of Cell Communication and Signaling

      Volume: 17 Pages: 1501~1515

    • DOI

      10.1007/s12079-023-00782-7

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Dual roles of cellular communication network factor 6 (CCN6) in the invasion and metastasis of oral cancer cells to bone via binding to BMP2 and RANKL2023

    • Author(s)
      Hochi Hiroaki、Kubota Satoshi、Takigawa Masaharu、Nishida Takashi
    • Journal Title

      Carcinogenesis

      Volume: 44 Pages: 695~707

    • DOI

      10.1093/carcin/bgad057

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Do not overwork: cellular communication network factor 3 for life in cartilage2023

    • Author(s)
      Kubota Satoshi、Kawaki Harumi、Perbal Bernard、Takigawa Masaharu、Kawata Kazumi、Hattori Takako、Nishida Takashi
    • Journal Title

      Journal of Cell Communication and Signaling

      Volume: 17 Pages: 353~359

    • DOI

      10.1007/s12079-023-00723-4

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 軟骨細胞分化においてPPARγが機能する可能性2024

    • Author(s)
      畚野里紗、河田かずみ、滝川正春、上岡 寛、久保田聡
    • Organizer
      第36回日本軟骨代謝学会
  • [Presentation] 軟骨細胞における核内CCN2の生理的役割2024

    • Author(s)
      西田 崇、長尾有里香、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第36回日本軟骨代謝学会
  • [Presentation] CCN2がGDF5およびその受容体との結合を介して軟骨細胞分化に及ぼす影響の検討2024

    • Author(s)
      東原直裕、青山絵理子、古松毅之、久保田聡、尾﨑敏文、滝川正春
    • Organizer
      第36回日本軟骨代謝学会
  • [Presentation] S-アデノシルメチオニンによる軟骨細胞保護作用のメカニズム:ポリアミン合成と軟骨細胞関連遺伝子発現の相互作用2024

    • Author(s)
      Hoang, L., Aoyama, E., Hiasa, M., Omote, H., Kubota, S., Kuboki, T., Takigawa, M.
    • Organizer
      第36回日本軟骨代謝学会
  • [Presentation] 股関節における変形性股関節症関連遺伝子の網羅的解析2024

    • Author(s)
      奥田龍一郎、廣瀬一樹、中田英二、鉄永智紀、山田和希、小浦 卓、井上智博、滝川正春、尾崎敏文、久保田聡、服部高子
    • Organizer
      第36回日本軟骨代謝学会
  • [Presentation] S-adenosylmethionine enhances chondrocyte differentiation via polyamine and chondrogenesis-related gene expression.2023

    • Author(s)
      Hoang, L., Aoyama, E., Hiasa, M., Omote, H., Kuboki, T., Kubota, S., Takigawa, M.
    • Organizer
      The 102nd IADR General session
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] C-Type lectin receptor CD302 increases osteoblast adhesion and survival.2023

    • Author(s)
      Aoyama, E., Kubota, S., Takigawa, M.
    • Organizer
      The 102nd IADR General session
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] CCN2 は BMPRIb を介して軟骨細胞における GDF5 の生理活性を抑制する2023

    • Author(s)
      東原直裕、青山絵理子、古松毅之、久保田聡、尾崎敏文、滝川正春
    • Organizer
      第55回日本結合組織学会
  • [Presentation] PDGFRL と CCNs の相互作用による Hippo pathway を介した軟骨細胞における細胞増殖・分化調節機構2023

    • Author(s)
      河田かずみ、青山絵理子、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第55回日本結合組織学会
  • [Presentation] S- アデノシルメチオニンは、ポリアミン合成と分化関連遺伝子発現を促進することにより、軟骨細胞の分化を調節する。2023

    • Author(s)
      ホアン ディン ロック、青山絵理子、日浅未来、表弘志、久保田聡、 窪木拓男、滝川正春
    • Organizer
      第55回日本結合組織学会
  • [Presentation] BMP2 及び RANKL への結合を介した口腔がん細胞の骨転移に対するCCN6の2つの作用2023

    • Author(s)
      芳地浩彰、久保田聡、滝川正春、西田 崇
    • Organizer
      第55回日本結合組織学会
  • [Presentation] 軟骨組織におけるCCN3の老化マーカーとしての役割と、CCN3の異所性発現による加齢様退行性変化の促進2023

    • Author(s)
      桑原実穂、廣瀬一樹、近藤 星、古松毅之、中田英二、原 哲也、久保田聡、服部高子
    • Organizer
      第55回日本結合組織学会
  • [Presentation] CCN2 は GDF5 およびその受容体との結合を介して軟骨細胞分化を制御する。2023

    • Author(s)
      東原直裕、青山絵理子、古松毅之、久保田聡、尾﨑敏文、滝川正春
    • Organizer
      第41回日本骨代謝学会
  • [Presentation] 軟骨細胞における CCN2 由来 circRNA の発現および機能の探索2023

    • Author(s)
      加藤壮真、河田かずみ、西田 崇、水川朋美、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第41回日本骨代謝学会
  • [Presentation] C 型レクチン受容体 CD302 を介した骨芽細胞の接着および遊走制御機構の解明2023

    • Author(s)
      青山絵理子、久保田聡、滝川正春
    • Organizer
      第41回日本骨代謝学会
  • [Presentation] Positive regulation of S-adhenosylmethione on chondrocytic differentiation via stimulation of polyamine production and gene expression of chondrogenitic differentiation factors.2023

    • Author(s)
      Hoang, L., Aoyama, E., Hiasa, M., Omote, H., Kubota, S., Kuboki, T., Takigawa, M.
    • Organizer
      第41回日本骨代謝学会
  • [Presentation] CCN2とGDF5およびその受容体との結合の解析と軟骨細胞における意義2023

    • Author(s)
      東原直裕、青山絵理子、古松毅之、久保田聡、尾﨑敏文、滝川正春
    • Organizer
      第14回日本CCNファミリー研究会
  • [Presentation] Positive regulation of S-adenosylmethionine on chondrocytic differentiation via stimulation of polyamine production and gene expression of chondrogenic differentiation factors2023

    • Author(s)
      Hoang, L., Aoyama, E., Hiasa, M., Omote, H., Kubota, S., Kuboki, T., Takigawa, M.
    • Organizer
      第14回日本CCNファミリー研究会
  • [Presentation] 軟骨細胞におけるCCN2の核移行の意義2023

    • Author(s)
      西田 崇、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第14回日本CCNファミリー研究会
  • [Presentation] 軟骨細胞におけるCCN2由来circRNAの発現とその機能の可能性2023

    • Author(s)
      加藤壮真、河田かずみ、西田 崇、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第14回日本CCNファミリー研究会
  • [Presentation] 軟骨細胞増殖・分化におけるHippo pathwayを介したCCNsとPDGFRLの関与2023

    • Author(s)
      河田かずみ、青山絵理子、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第14回日本CCNファミリー研究会
  • [Presentation] 軟骨細胞におけるCCN2由来circRNAの発現とその機能の可能性2023

    • Author(s)
      加藤壮真、河田かずみ、西田 崇、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      第65回歯科基礎医学会
  • [Presentation] Positive regulation of S-adenosylmethionine on chondrocytic differentiation via stimulation of polyamine production and gene expression of chondrogenic differentiation factors2023

    • Author(s)
      Hoang, L., Aoyama, E., Kubota, S., Kuboki, T., Takigawa, M.
    • Organizer
      第65回歯科基礎医学会
  • [Presentation] CCN3は軟骨細胞老化マーカーであり、年齢、荷重の有無に関わらず変形性関節症と相関する。2023

    • Author(s)
      服部高子、滝川正春、久保田聡
    • Organizer
      。第65回歯科基礎医学会
  • [Presentation] GDF5およびその受容体との結合を介したCCN2の軟骨細胞分化制御機構2023

    • Author(s)
      東原直裕、青山絵理子、久保田聡、尾﨑敏文、滝川正春
    • Organizer
      第38回日本整形外科学会基礎学会
  • [Presentation] Positive regulation of S-adenosylmethionine on chondrocytic differentiation via stimulation of polyamine production and gene expression of chondrocytic differentiation factors.2023

    • Author(s)
      Hoang, L., Aoyama, E., Kubota, S., Kuboki, T., Takigawa, M.
    • Organizer
      第96回日本生化学会
  • [Presentation] 軟骨組織の加齢とともに発現が上昇するCCN3は、その発現上昇と軟骨変性度が年齢、荷重の有無に関わらず相関する。2023

    • Author(s)
      桑原実穂、廣瀬一樹、近藤 星、Fu Shanqi、大野充昭、古松毅之、中田英二、滝川正春、久保田聡、服部 高子
    • Organizer
      第96回日本生化学会
  • [Remarks] 岡山大学歯学部先端領域研究センター

    • URL

      http://www.dent.okayama-u.ac.jp/arcocs

URL: 

Published: 2024-12-25  

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