In vitro reconstitution of intraflagellar transport by cytoplasmic dynein-2

2021 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 20K21378
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Medium-sized Section 43:Biology at molecular to cellular levels, and related fields
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: Niwa Shinsuke 東北大学, 学際科学フロンティア研究所, 准教授 (30714985)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小田 賢幸 山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (20569090)
• Project Period (FY): 2020-07-30 – 2022-03-31
• Keywords: ダイニン

Outline of Final Research Achievements

Defects in retrograde intrafragellar transport(IFT) induces a series of diseases called ciliopathy. To understand the mechanism of ciliopathies, it is important to reconstitute intraflagellar transport in vitro. We purified recombinant cytospasmic dynein 2 from chlamydomonas. Recombinant dynein 2 was inactive because of autoinhibitory mechanisms as anticipated. To unlock the autoinhibition in vitro, we purified IFT complex from chlamydomonas as well.

Free Research Field

細胞生物学

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

逆行性の繊毛内輸送(IFT)の分子モータータンパク質であるダイニン２複合体の活性化をin vitroで再構成することは世界中で誰も成功していない学術的に重要な問題である。この問題に取り組むために本研究ではクラミドモナスからダイニン２複合体の精製を行った。本研究で精製に成功した組換えダイニン２複合体は今後１分子計測の手法によってダイニン２複合体の活性化メカニズムを解析するための基盤となる。