2021 Fiscal Year Annual Research Report
HBc抗体陽性非ウイルス性肝癌のHBVゲノム挿入部位の同定及び発癌機構の解明
Project/Area Number |
20K22951
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
鈴木 理滋 北海道大学, 医学研究院, 助教 (60870532)
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Project Period (FY) |
2020-09-11 – 2022-03-31
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Keywords | HBV / インテグレーション |
Outline of Annual Research Achievements |
自己免疫によりB型肝炎ウイルス(HBV)の増殖を抑制した感染者(HBV既往感染者)は抗癌剤や肝移植時以外はほとんど症状が出ないため、治療やフォローアップは必要ないと考えられてきた。しかしながら、近年既往感染マーカーであるHBc抗体陽性の症例が一定数以上いる事が明らかになってきた。これはHBV既往感染者でも肝細胞癌(HCC)を発症することを示唆しているが、その詳細は明らかにされていない。そこで本研究では両者の関係性を明らかにするため、ヒト検体を用いてHBVゲノムのインテグレーションサイトの網羅的同定を行う。本研究期間全体を通じて研究代表者は実験に使用するHbc抗体陽性非ウイルス性肝癌検体のピックアップを行い、全29検体の患者情報(年齢、性別、基礎疾患等)をまとめた。次に次世代シーケンス解析を行うため、まずはHBVゲノムがインテグレートされた培養細胞を用いてDNAライブラリー調製の条件検討を行った。DNA抽出後のDNAを目的の大きさの断片化にするのに苦心したが、無事に最適なソニケーションの実験条件を見つけ出し、無事にDNAライブラリーを調製する条件を見出した。また、肝臓組織を用いても見出した条件でDNAライブラリーを作製しうることを明らかにした。その後、次世代シーケンス解析を行う予定であったが、新型コロナウイルス流行の影響により、共同研究先での次世代シーケンス解析を行うことはできなかったが、今後のヒト検体を用いたDNAライブラリー調製方法を確立できた。
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Research Products
(1 results)