2009 Fiscal Year Annual Research Report
低分子抗体医薬開発に最適化されたヒト抗体ライブラリ構築と選別法の確立
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21390032
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
伊東 祐二 Kagoshima University, 理工学研究科(工学系), 准教授 (60223195)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
有馬 直道 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (30175997)
黒木 良太 独立行政法人日本原子力研究開発機構, 量子ビーム応用研究部門, ユニット長 (30391246)
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| Keywords | 抗体 / 低分子化抗体 / T7ファージ / ファージ提示法 / 安定性 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、新しいファージ提示技術であるT7ファージ提示技術を用いて構築したヒト単鎖Fv抗体(低分子抗体)ライブラリを用いて、医薬として利用できる高機能性の低分子抗体の創製方法を構築し、得られた抗体の性質、構造を解析することで、抗体工学による高機能性低分子抗体デザインのための分子基盤を確立することである。
本年度は、T7提示系を用いたヒト抗体のライブラリ作製について検討を行った。合成ヒト抗体ライブラリでは、抗体フレームのCDRの領域に変異を導入した変異遺伝子ライブラリを調製し、その遺伝子ライブラリの機能性を評価するため、繊維状ファージによるライブラリ化を行った。構築した繊維状ファージによるライブラリからは、抗原特異的な抗体クローンが多数得られたことから、抗体遺伝子ライブラリは高い機能性を有していることが分かった。そこで、遺伝子ライブラリをT7ファージ提示系に移入することでライブラリを構築した。このライブラリを用いて、抗原に対するバイオパンニングという単離手法により、抗原特異的な抗体の単離を試みた。結果としてファージクローンの濃縮が見られたものの、得られたクローンの多くは、非特異的な結合がみられたことから単離手法の改良が必要であることが分かった。しかしながら、少数のクローンについては、特異的な結合がみられたことから、原理的にT7提示による抗体ライブラリからの単離手法の確立が可能であることが示された。
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[Journal Article] Regulation of T cell response by blocking the ICOS signal with the B7RP-1-specific small antibody fragment isolated from human antibody phage library2009
Author(s)
Maeda, M., Ito, Y., Hatanaka, T., Hashiguchi, S., Torikai, M., et al.
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Journal Title
Peer Reviewed
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