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2012 Fiscal Year Annual Research Report

高血圧に伴う酸化・ニトロ化傷害への長期運動効果の分子機構をモデルラットで解明する

Research Project

Project/Area Number 21500695
Research InstitutionJuntendo University

Principal Investigator

山倉 文幸  順天堂大学, 医療看護学部, 教授 (20053358)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 川崎 広明  順天堂大学, 医学(系)研究科(大学院), 研究員 (40531380)
Project Period (FY) 2009-04-01 – 2013-03-31
Keywordsニトロ化ストレス / ニトロトリプトファン / ニトロチロシン / プロテオミクス / 身体運動
Research Abstract

[目的] 平成23年度は、髙血圧ラットへと移行する前段階として、我々が見出した新たな酸化ストレスマーカー・6ニトロトリプトファン(6-NO2Trp)の生成を正常ラットの脳で検討した。その結果、非運動群のラットにおいて解糖系の酵素など12種を6-NO2Trp含有タンパク質として同定したが急性運動、運動トレーニングの何れにおいても有意差は見出されなかった。今年度は、より運動の効果が期待出来る骨格筋を対象に、6-NO2Trp含有タンパク質の同定と運動による変動を正常ラットで検討する。最後に、6-NO2Trp含有タンパク質の血清での高血圧病態マーカーとしての応用を目指し、髙血圧ラットと対照ラットの血清を用い、6-NO2Trp含有タンパク質の違いを検討する。
[方法]3ヵ月齢の雄のF344ラットを用いた。ラットに中強度持久性走運動(15m/minの速度で1時間のトレッドミル走)あるいは高強度間欠性走運動(50m/minの速度で1分間のトレッドミル走を1分間隔で18回)を行わせ、その直後にヒラメ筋と足底筋を採取した。ニトロ化修飾されたタンパク質は2次元電気泳動と特異的抗体を用いたウェスタンブロッティング、質量分析装置を用いて検出した。更に、自然発症髙血圧ラット(SHR)とWSKラットの血清を用い、前処理後、同様に6-NO2Trp含有タンパク質の検討を行った。
[結果]中強度持久性走運動と高強度間欠性走運動により変動した約60kDa付近のスポットから6-NO2Trp含有タンパク質を見出した。このスポットのタンパク質を質量分析装置で分析した結果、∝-skeletal muscle actinであった。更に、SHRの血清に特異的に生じている6-NO2Trp含有タンパク質も見出した。今後、タンパク質の同定を行い、運動における変動も検討する。

Current Status of Research Progress
Reason

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (11 results)

All 2012

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (8 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Proteomic analysis of endogenous nitrotryptophan-containing proteins in rat hippocampus and cerebellum2012

    • Author(s)
      Uda M, Kawasaki H, Shigenaga A, Baba T, Yamakura F
    • Journal Title

      Bioscience reports

      Volume: 32 Pages: 521-530

    • DOI

      DOI:10.1042/BSR20120032

  • [Journal Article] “Indolepyruvate ferredoxin oxidoreductase: An oxygen-sensitive iron-sulfur enzyme from the hyperthermophilic archaeon Thermococcus profundus2012

    • Author(s)
      Ozawa Y, Siddiqui, MA, Takahashi Y, Urushiyama A, Ohmori, D, Yamakura F, Arisaka F, Imai, T
    • Journal Title

      J Biosci Bioeng

      Volume: 114 Pages: 23-27

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2012.02.014

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 心筋細胞における解糖系酵素GAPDHを介したインスリンシグナル伝達2012

    • Author(s)
      馬場猛 他3名
    • Organizer
      第85回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場、福岡
    • Year and Date
      20121214-20121216
  • [Presentation] Identification of nitrotryptophan-containing proteins in the lesional skin of atopic NC/Nga mice2012

    • Author(s)
      冨永光俊 他6名
    • Organizer
      第37回日本研究皮膚科学会学術大会
    • Place of Presentation
      那覇、沖縄
    • Year and Date
      20121206-20121209
  • [Presentation] Proteomic and Functional analysis of protein tryptophan nitration in the neuronal cell differentiation2012

    • Author(s)
      Kawasaki H 他6名
    • Organizer
      13th International Society for Tryptophan Research (ISTRY2012)
    • Place of Presentation
      Sydney, Australia
    • Year and Date
      20121107-20121109
  • [Presentation] Proteomic analysis of endogenous nitrotryptophan-containing proteins in rat hippocampus and cerebellum2012

    • Author(s)
      Uda M 他4名
    • Organizer
      13th International Society for Tryptophan Research (ISTRY2012)
    • Place of Presentation
      Sydney, Australia
    • Year and Date
      20121107-20121109
  • [Presentation] Identification of nitrotryptophan in proteins isolated from skin lesions of an atopic model mouse. A possible novel biomarker for atopic predisposition.2012

    • Author(s)
      Yamakura F 他6名
    • Organizer
      13th International Society for Tryptophan Research (ISTRY2012)
    • Place of Presentation
      Sydney, Australia
    • Year and Date
      20121107-20121109
  • [Presentation] 骨格筋におけるニトロトリプトファン含有タンパク質のプロテオーム解析2012

    • Author(s)
      宇田宗弘 他4名
    • Organizer
      第67回日本体力医学会大会
    • Place of Presentation
      長良川国際会議場、岐阜
    • Year and Date
      20120914-20120916
  • [Presentation] Formation of nitrated tryptophan residues as a novel post-translational modification in the physiological state2012

    • Author(s)
      Yamakura F 他5名
    • Organizer
      The 7th International Conference of the Biology, Chemistry and Therapeutic Application of Nitric Oxide
    • Place of Presentation
      Edinburgh, UK
    • Year and Date
      20120722-20120726
  • [Presentation] 細胞分化誘導時で新たに見出された6-ニトロトリプトファン化タンパク質2012

    • Author(s)
      川崎広明 他5名
    • Organizer
      第12回日本NO学会学術集会
    • Place of Presentation
      神戸、兵庫
    • Year and Date
      20120629-20120630
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 一酸化窒素ストレスの診断方法2012

    • Inventor(s)
      山倉文幸 川崎広明 酒居一雄
    • Industrial Property Rights Holder
      山倉文幸 川崎広明 酒居一雄
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      特願 2012-162006
    • Filing Date
      2012-07-20

URL: 

Published: 2014-07-24  

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