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2010 Fiscal Year Annual Research Report

エネルギー移行型蛍光プローブによる生存がん幹細胞分離法の診断と治療指標への有用性

Research Project

Project/Area Number 21590622
Research InstitutionHamamatsu University School of Medicine

Principal Investigator

竹下 明裕  浜松医科大学, 医学部, 准教授 (00242769)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大西 一功  浜松医科大学, 医学部附属病院, 教授 (80252170)
KeywordsmRNA / 癌細胞 / 白血病細胞 / bcr-abl / Kras
Research Abstract

donor probeとacceptor probeに、アビジン蛋白を結合させ、導入される色素probeの分子量の設定をしたところ、高分子化蛍光probeを使用した場合は核内に蛍光は認められなかったが、蛍光物質結合低分子物質核内まで到達してしまった。核内に集積せず、胞体に局在する至適donor probeとacceptor probeの設定が必要とされる。培養細胞にdonorおよびacceptor probeとincubateし、キメラRNA陽性細胞でFRET蛍光が上昇することをスペクトロメーター等により解析した。Bcr-ablに関しては、その発現が多いとされる細胞においても、蛍光が増強しなかったため、プローブの設定と蛍光感度を再点検したが、問題点(解決点)は見出せなかった。1細胞あたりの発現量が多い、KRAS mRNAに対し作製されたprobeの特異性を確認した。
QUAL-FRET法を利用した癌細胞分離方法の確認特異的蛍光probeの癌細胞(初期実験モデルとしての白血病細胞)への導入とgatingとsortingによる分離効率の調整、そして生細胞率の向上をねらった。
これまでの検討では生細胞率と導入効率は逆相関があり、KRAS mRNAでも確認した。細胞の種類によってはprobe導入により生存率が低下することが判明したが、技術的な向上をはかっていく必要がある。

  • Research Products

    (6 results)

All 2011 2010

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (2 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Impact of additional chromosomal abnormalities in patients with acute promyelocytic leukemia : 10-year results of the Japan Adult Leukemia Study Group APL97 study.2011

    • Author(s)
      Ono T, Takeshita A, et al
    • Journal Title

      Haematologica

      Volume: 96(1) Pages: 174-176

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Collaborative study of irregular erythrocyte antibodies in Japan : results from the Japanese study group of allo-immunity and antigen diversity in Asian populations.2010

    • Author(s)
      Takeshita A, et al
    • Journal Title

      Transfus Apheresis Sciences

      Volume: 43(1) Pages: 3-8

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Erythrocyte allo-immunization analyzed by gender and transfusion status2010

    • Author(s)
      Takeshita A, et al
    • Organizer
      52^<nd> Annual Meeting of American Society of Hematology
    • Place of Presentation
      Orange County Convention Center, Orland, Florida
    • Year and Date
      20101204-20101206
  • [Presentation] Clinical features and outcomes in elderly patients with acute promyelocytic leukemia -the Japan Adult Leukemia Study Group APL97 study-2010

    • Author(s)
      Ono T, Takeshita A, et al
    • Organizer
      American Society of Hematology (ASH) Annual Meeting and Exposition (52nd)
    • Place of Presentation
      Orange County Convention Center, Orlando, Florida
    • Year and Date
      20101204-20101206
  • [Book] APLにおけるレチノイン酸症候群とケモカイン産生2010

    • Author(s)
      竹下明裕
    • Total Pages
      5
    • Publisher
      血液・腫瘍科
  • [Book] 血液疾患における分子標的治療 ドラッグラグ解消に向けて 白血病急性前骨髄球性白血病に対するレチノイン酸Am80 最近の進展2010

    • Author(s)
      竹下明裕
    • Total Pages
      6
    • Publisher
      血液フロンティア

URL: 

Published: 2012-07-19  

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