2009 Fiscal Year Annual Research Report
インフルエンザ脳症の組織培養モデルを用いた薬剤による病態の増悪及び改善の検討
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21591330
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
細矢 光亮 Fukushima Medical University, 医学部, 教授 (80192318)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
川崎 幸彦 公立大学法人福島県立医科大学, 医学部, 准教授 (00305369)
橋本 浩一 公立大学法人福島県立医科大学, 医学部, 講師 (50322342)
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| Keywords | ヒト臍帯静脈血管内皮細胞 / TNF-α / 消炎鎮痛剤 / アポトーシス / MTT法 / 細胞毒性 / インフルエンザ / 脳症 |
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| Research Abstract |
本年度は臍帯からヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)の効率的な単離培養法の確立と、単離培養したHUVECを用いてTNF-αのアポトーシス誘導および各種消炎鎮痛剤の影響について検討した。
(1) HUVECの単離培養法の確立。
本研究への協力の同意が得られた、当施設で出生した児より臍帯を提供して頂き、唐崎らの論文(J UOEH,18(4):281-285,1996)を参考にして、施設内でHUVECの単離培養法を確立した。単離培養法の確立により、常時十分量のHUVECを用いた検討が可能になった。
(2) TNF-αのHUVECにおけるアポトーシス誘導。
TNF-α(10pg/ml～100ng/ml)を培養液に添加し、24時間後にAPOPercentage法によるアポトーシスの評価では、TNF-αは濃度依存的にアポトーシスを誘導し、以後の実験のTNF-α至適濃度を10ng/mlに決定した。
(3) 各種消炎鎮痛剤のTNF-α存在下でのHUVECへの影響。
消炎鎮痛剤としてメフェナム酸、ジクロフェナックナトリウム、イブプロフェン、インドメタシン、アセトアミノフェンを用い、TNF-α(10ng/ml)存在下でのHUVECへの細胞毒性をMTT法で評価した。薬剤濃度250μM、125μMでの検討ではイブプロフェン、アセトアミノフェンはともに細胞毒性は認められなかったが、メフェナム酸はTNF-αの存在により細胞毒性が増強された。ジクロフェナックナトリウム、インドメタシンは125μMでは毒性を示さなかったが、250μMでは細胞毒性を示した。
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