毛包特異的癌抑制遺伝子ノックアウトマウスの作製:癌幹細胞の制御を目指して

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21591435
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 村上 信司 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (50175626)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平川 聡史 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (50419511)
• Keywords: PTEN / コンディショナルノックアウト / ケラチン15 / Cre/loxP / 癌抑制遺伝子 / 扁平上皮癌 / 癌幹細胞 / マウス

Research Abstract

本研究課題では、毛包特異的PTENコンディショナル・ノックアウトマウスK15-CrePGR/PTEN^<-/->を作製し、表現型解析を行う。マウス・バルジ細胞に由来する皮膚悪性腫瘍を誘導し、皮膚癌幹細胞のモデルとして確立することを目指す。
K15-CrePGR(FVB/N)の作製:K15-CrePGRは、系統C57BL/6・SJLである。従って、本研究課題ではあらかじめC57BL/6と交配し、新たな系統K15-CrePGR(C57BL/6)を作製した。
Cre-loxPシステムによる表皮特異的PTENFコンディショナルノックアウト・マウス(K15-CrePGR/PTEN^<-/->,FVB/N background)の作製:FVB/N background, Cre-loxPシステムを用いたケラチン15(K15)プロモーターによるバルジ特異的コンディショナルノックアウトマウスを作製した。K15-CrePGR及びloxP-flanked PTENマウスをbackcrossし、FVB/N backgroundを作製した。以上の工程で、K15-CrePGR及びloxP-flanked PTENマウスを交配し、K15-PTENノックアウトマウスを作製した(FVB/N backgournd)。
Creリコンビナーゼ発現誘導:K15-CrePGRトランスジェニックマウスは、プロゲステロン拮抗阻害剤RU486を皮膚に塗布することにより、Creリコンビナーゼの発現を誘導することが可能である。生後8週齢、雄雌のマウスに、5日間にわたりRU486を塗布し皮膚表現形について観察中である。
自然発癌誘導と観察:表皮特異的K5-Cre/PTEN^<-/->は、PTENの消失とともに自然経過で扁平上皮癌を生じる。従って、K15-CrePGR/PTEN^<-/->においても発癌が自然経過で生じるかどうかRU486を継続投与し長期間観察中である。

Research Products

• [Journal Article] Syndrome of inappropriate secretion of antidiuretic hormone induced by tacrolimus in a patient with systemic lupus erythematosus. (2011)
  • Author(s): Suemori K, Hasegawa H, Nanba C, Kohno M, Matsumoto T, Kawamoto Y, Murakami S, Sada E, Hashimoto K, Yasukawa M
  • Journal Title: Mod Rheumatol Volume: 21 Pages: 97-100
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Possible association of vascular endothelial growth factor with the development of edema in drug-induced hypersensitivity syndrome (2011)
  • Author(s): Hirakawa S, Okazaki H, Sayama K, Tohyama M, Hashimoto K
  • Journal Title: J Dermatol Volume: 38 Pages: 292-294
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Mite allergen is a danger signal for the skin via activation of inflammasome in keratinocytes (2011)
  • Author(s): Dai X, Sayama K, Tohyama M, Shirakata Y, Hanakawa Y, Tokumaru S, Yang L, Hirakawa S, Hashimoto K
  • Journal Title: J Allergy Clin Immunol Volume: 127 Pages: 806-814.e1-e4
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Regulation of pathological lymphangiogenesis requires factors distinct from those governing physiological lymphangiogenesis (2011)
  • Author(s): Hirakawa S
  • Journal Title: J Dermatol Sci Volume: 61 Pages: 85-93
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Multiple lymphadenopathy as an initial sign of extramammary Paget disease (2011)
  • Author(s): Hirakawa S, Tanemura A, Mori H, Katayama I, Hashimoto K
  • Journal Title: Br J Dermatol Volume: 164 Pages: 200-203
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PPAR_Y mediates innate immunity by regulating the 1α,25-dihydroxyvitamin D3 induced hBD-3 and cathelicidin in human keratinocytes (2010)
  • Author(s): Dai X, Sayama K, Tohyama M, Shirakata Y, Hanakawa Y, Tokumaru S, Yang L, Hirakawa S, Hashimoto K
  • Journal Title: J Dermatol Sci Volume: 60 Pages: 179-186
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] E2 Polyubiquitin-conjugating enzyme Ubc13 in keratinocytes is essential for epidermal integrity (2010)
  • Author(s): Sayama K, Yamamoto M, Shirakata Y, Hanakawa Y, Hirakawa S, Dai X, Tohyama M, Tokumaru S, Shin MS, Sakurai H, Akira S, Hashimoto K
  • Journal Title: J Biol Chem Volume: 285 Pages: 30042-30049
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Inflammatory mediator TAK1 regulates hair follicle morphogenesis and anagen induction shown by using keratinocyte-specific TAK1-deficient mice (2010)
  • Author(s): Sayama K, Kajiya K, Sugawara K, Sato S, Hirakawa S, Shirakata Y, Hanakawa Y, Dai X, Ishimatsu-Tsuji Y, Metzger D, Chambon P, Akira S, Paus R, Kishimoto J, Hashimoto K
  • Journal Title: PLoS One Volume: 5 Pages: e11275
  • Peer Reviewed