悪性黒色腫シグナル伝達異常による免疫療法抵抗性の解明と克服法の開発

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21591445
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 桜井 敏晴 Keio University, 医学部, 助教 (20101933)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤田 知信 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (20199334) ; 塚本 信夫 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (20407117) ; 河上 裕 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50161287)
• Keywords: 悪性黒色腫 / 免疫抑制 / 免疫療法 / シグナル伝達 / 樹状細胞

Research Abstract

ヒト悪性黒色腫においては、多様な免疫抵抗性機序が働き、担がん生体での免疫抑制状態や免疫療法に対する抵抗性をもたらし、臨床的にも大きな問題になっている。担がん生体では、悪性黒色腫細胞の存在を起点として、免疫抑制カスケードが作動して、免疫抑制環境が構築されるが、悪性黒色腫細胞の遺伝子・分子異常による免疫抑制機構の詳細は十分に解明されていない。今までに我々は、悪性黒色腫に高頻度に起こる活性型変異BRAFによるMAPKシグナル亢進が複数の免疫抑制分子(IL6,IL10,VEGF等)の産生を誘導し、免疫抑制を起こすことを明らかにしてきたが、まだ悪性黒色腫の免疫抑制に関与するシグナル伝達経路は十分に解明されていない。本年度は、免疫抑制に関与する新規シグナル伝達分子の同定を目標として、siRNAライブラリーを用いて、ヒト悪性黒色腫細胞株が分泌する、樹状細胞の抗腫瘍サイトカインIL12の産生を抑制する因子に関与するシグナル分子の同定を試みた。樹状細胞の機能を抑制する因子を分泌するヒト悪性黒色腫細胞株に、キナーゼsiRNAライブラリーを作用させて、その培養上清のLPS刺激後のヒト樹状細胞からのIL12の産生への影響をスクリーニングした。その結果、培養上清の樹状細胞IL12産生抑制能を減少させるキナーゼsiRNAを複数同定することに成功した。その内の一つのsiRNAは、樹状細胞の機能を抑制する作用をもつ複数のサイトカインの悪性黒色腫株からの産生を抑制できることが明らかになった。今後、同定したシグナル分子の多数の悪性黒色腫組織での発現活性化状態の検討と、そのシグナル伝達機構の全容の解明を予定している。