2010 Fiscal Year Annual Research Report
歯胚形態形成におけるサイモシン ベーター 4を中心とした分子ネットワークの解明
Project/Area Number |
21592331
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Research Institution | Kyushu University |
Principal Investigator |
小林 家吉 九州大学, 大学院・歯学研究院, 准教授 (40243951)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂井 英隆 九州大学, 大学院・歯学研究院, 教授 (80136499)
永田 健吾 九州大学, 大学院・歯学研究院, 助教 (90189134)
清島 保 九州大学, 大学院・歯学研究院, 講師 (20264054)
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Keywords | 歯の発生 / 基底膜 / 歯胚 / 細胞・組織 / 歯学 / ノックダウンアッセイ / アンチセンス法 / 器官培養 |
Research Abstract |
本科学研究補助金により2年次平成21年度において以下の研究成果を得た。 1. Thymoshin beta 4 (Tβ4)と同様にcDNAサブトラクション法により胎生12日齢(E12.0)の下顎に高発現を呈する15 kDa interferon alpha responsive gene (Ifrg 15)およびmitochondrial ATPase6 (Atpase6)について歯胚における発現様式を解析し、Ifrg 15およびAtpase6が歯胚の発生やエナメル質の形成に関与を示す発現パターンを捉えた。この研究成果を論文に発表した。 2. Tβ4の歯胚発生過程における機能的役割を明らかにする目的に、平成21年度に引き続いてTβ4の機能解析を進めてきました。当該年度における研究成果を以下に示す。(1)平成21年度においてE11.0下顎およびE15.0歯胚の器官培養下Tβ4アンチセンスオリゴ(Tβ4 AS S-ODN)を用いてTβ4発現ノックダウンアッセイを行い、歯胚形態形成においてTβ4は重要な機能的役割を担っていることが明らかにした。これと同条件下E11.0下顎器官培養における蛋白質の定量解析を行った所、Tβ4ノックダウンにおいてRunx2蛋白質の有意な発現低下を認めた。(2)同材料を用いて歯胚の細胞増殖活性度についてKi-67抗体を用いた免疫組織化学染色で検索した所、Tβ4 AS S-ODN処理したE11.0下顎とコントロールに有意な差を認めなかった。(3)歯原性上皮細胞を用いて細胞移動におけるTβ4の機能解析を行った。歯原性上皮細胞をTβ4 AS S-ODNで24時間処理した結果、コントロールに比較して細胞移動度の有意な低下がみられた。
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