2011 Fiscal Year Annual Research Report
歯科バイオマテリアルへの歯周病原細菌の付着機構と特異的抗体による阻害に関する研究
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21592660
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| Research Institution | Meikai University |
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Principal Investigator |
安井 利一 明海大学, 歯学部, 教授 (20146252)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹下 玲 明海大学, 歯学部, 准教授 (70236454)
日比野 靖 明海大学, 歯学部, 准教授 (20238322)
村上 幸生 明海大学, 歯学部, 准教授 (00286014)
松本 勝 明海大学, 歯学部, 准教授 (00209652)
清水 良昭 明海大学, 歯学部, 准教授 (90206219)
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| Keywords | 歯学 / 細菌 / 歯周疾患 / 歯周病原性細菌 / P.gingivalis / 線毛 / 付着 / 歯科バイオマテリアル |
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| Research Abstract |
〓歯周病原性細菌Porphyromonas gingivalis線毛の抽出と精製方法の確立
Porphyromonas gingivalis(P.gingivalis)を培養後、遠心にて回収し、物理的に線毛を菌体から剥離させる。線毛を含む上清画分に40%飽和硫酸アンモニウムを加え、タンパク質を塩析させた後、透析したものを、タンパク質画分として、DEAE Sepharose Fast Flow clumn(GE Healthcare)に吸着させ、0から1MのNaCl直線濃度勾配溶出法で精製線毛を分画し、得られた線毛を、SDS-PAGEの気泳動で、単一バンドであることを確認した。GE社のGE ATKA prime plusを使用し、線毛の精製を行っているが、精製が過程で線毛のロスが著しく、現在も、精製法の確立を継続している。
〓Porphyromonas gingivalis線毛のマクロファージ様細胞の作用の検討
精製した、Porphyromonas gingivalis(P.gingivalis)線毛は、強いサイトカイン誘導作用を有している。そこで、精製した線毛が、その活性を有していることを確認する目的で、マクロファージ様細胞RAW264.7細胞のサイトカイン誘導能について確認した。
また、単球様細胞としてM1細胞を用いP.gingivalis線毛のアポトーシスに対する影響を検討した。その結果、本菌線毛は、本細胞のアポトーシスを強く抑制することが明らかとなった。
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