メダカ突然変異体の解析による始原生殖細胞の発生機構の解明

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21770245
• Research Institution: National Institute for Basic Biology
• Principal Investigator: 笹土 隆雄 National Institute for Basic Biology, バイオリソース研究室, 特別協力研究員 (90511204)
• Keywords: 生殖細胞 / 疾患モデル / 発生生物学 / 小型魚類 / メダカ

Research Abstract

これまでに収集した始原生殖細胞の移動に異常が見られるメダカ変異体の中から、始原生殖細胞が生殖巣へと移動する過程に異常が見られる3系統、kamigamo、shimogamo、narutoについて、当該年度はポジショナルクローニングによる原因遺伝子の特定に着手した。
変異体は南日本に生息するメダカ系統から作成されたので、遺伝的な背景が大きく異なる北日本に生息するメダカ系統と交配して変異をホモに持つF2個体を得た後、原因遺伝子の遺伝子座に密接に連鎖している多型マーカーをPCR-RFLP(Restr iction Fragment Length Polymorphism)法やPCR-SSLP(Simple Sequence Length Polymorphism)法によって調べた。これまでにkamigamo、shimogamo、narutoについて、それぞれ約1000、2000、500個のF2個体を用いて連鎖マーカーを調べたところ、3つの変異の存在が予想される染色体上の領域をそれぞれ約250kb,200kb,2000kb以下に絞り込んだ。これらの突然変異体の表現形から原因遺伝子として特定が可能な遺伝子はこの領域内に存在しない為に、始原生殖細胞の移動に関わる新しい分子機構を今後明らかに出来ると期待している。現在、より詳細な連鎖解析を進めて変異が存在する染色体上の領域を狭めているところである。特に、kamigamo、shimogamoの2つの変異体は、始原生殖細胞の異常な分布の表現形に高い類似性が見られると同時に、どちらも前腎管に嚢胞を生じる表現型も見られる。嚢胞腎はヒトで高頻度に見られる遺伝病であり、その発症の機構の解明という側面からも、これらの変異について特に優先的に研究を進展させる予定である。

Research Products

• [Journal Article] The National BioResource Project Medaka(NBRP Medaka): An Integrated Bioresource for Biological and Biomedical Sciences (2010)
  • Author(s): Sasado, T., Tanaka, M., Kobayashi, K., Sato, T., Sakaizumi, M., Naruse, K.
  • Journal Title: Experimental Animals Vol.59 Pages: 13-23
  • Peer Reviewed
• [Presentation] In vitro fertilization and sperm cryopreservation in Medaka (2010)
  • Author(s): Takao Sasado
  • Organizer: Karlsruher Institut fur Technologie(KIT), Institut fur Toxikologie und Genetik, Plactical Workshop
  • Place of Presentation: カールスルーエ工科大学、北部キャンパス(ドイツ、カールスルーエ)
  • Year and Date: 20100329-20100331
• [Presentation] Sperm cryopreservation and artificial insemination in medaka(Oryzias latipes) (2010)
  • Author(s): Takao Sasado
  • Organizer: The 5th NIBB International Practical Course
  • Place of Presentation: 基礎生物学研究所(岡崎市)
  • Year and Date: 20100129-20100130
• [Presentation] 教育の現場における脊椎動物の実験教材としてのメダカ-交配・産卵行動、受精・発生から遺伝およびトランスジェニック個体の観察に用いる- (2010)
  • Author(s): 笹土隆雄、成瀬清、野村浩一郎
  • Organizer: 日本生物教育学会 第88回全国大会
  • Place of Presentation: 東北工業大学(仙台市)
  • Year and Date: 2010-01-10
• [Presentation] メダカを用いたメンデル遺伝とRFLPとDNAシークエンサーによるDNA解析の教材化 -表現型と遺伝子型を教育現場で観察し易くする為の工夫について- (2010)
  • Author(s): 野村浩一郎、笹土隆雄、成瀬清
  • Organizer: 日本生物教育学会 第88回全国大会
  • Place of Presentation: 東北工業大学(仙台市)
  • Year and Date: 2010-01-10
• [Presentation] NBRP「メダカ」:生命科学研究をサポートする統合的生物遺伝資源を目指して (2009)
  • Author(s): 成瀬清、笹土隆雄、金子裕代、小林佳代、田中実、小原雄治、藤山秋佐夫、佐藤忠、酒泉満
  • Organizer: 第32回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(横浜市)
  • Year and Date: 20091209-20091212
• [Presentation] National Bioresource Project Medaka : NBRP Medaka (2009)
  • Author(s): Takao Sasado, Kayo Kobayashi, Tadashi Sato, Mitsuru Sakaizumi, Minoru Tanaka, Kiyoshi Naruse
  • Organizer: 6th European Zebrafish Genetics and Development Meeting
  • Place of Presentation: Palazzo dei Congressi(イタリア、ローマ)
  • Year and Date: 20090715-20090719
• [Book] Cryopreservation of medaka sperm.(In Kinoshita, M., Murata, K., and Naruse, K., Tanaka, M., ed., Medaka-Biology, Management, and Experimental Protocols) (2009)
  • Author(s): Sasado, T.
  • Total Pages: 444
  • Publisher: Wiley-Blackwell Co., Iowa, USA
• [Book] Artificial insemination using frozen medaka sperm.(In Kinoshita, M., Murata, K., Naruse, K.and Tanaka, M., ed., Medaka-Biology, Management, and Experimental Protocols) (2009)
  • Author(s): Sasado, T.
  • Total Pages: 444
  • Publisher: Wiley-Blackwell Co., Iowa, USA