2023 Fiscal Year Annual Research Report
A novel regulatory mechanism of the function of tumor suppressor p27 by a nucleolar protein NPM1.
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21K05510
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| Research Institution | Tokyo University of Agriculture |
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Principal Investigator |
千葉櫻 拓 東京農業大学, 生命科学部, 教授 (30227334)
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2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 細胞増殖制御 / p27 / NPM1 / p53 / タンパク質分解 / 足場非依存的増殖 / 細胞遊走・浸潤能 / がん転移 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
当初の研究テーマであるNPM1-p27間の相互作用機構および制御経路解析については、相互作用機構の概要とARFによるNPM1-p27制御機構を令和３年度の成果として論文発表し、詳細な分子解析は終了した。令和４年度以降は、新規に見出したp53によるp27分解抑制機構と足場非依存下でのがん細胞表現型のp27による抑制機構に関する研究を行った。
p53によるp27分解抑制機構：令和４年度にp27の10番目セリン (S10)または187番目スレオニン (T187)の非リン酸化型変異によりp53欠損下でのp27分解の抑圧が示されたため、両変異を二重導入した結果、各単一変異と比べてp53欠損下でのp27安定性が相加的に向上したことから、S10とT187のリン酸化に依存する別々のp27分解経路がともにp53によって抑制されていることが示唆された。これらのリン酸化はそれぞれCrm1およびSkp2が認識することが既知であるため、p53欠損下での発現量を調べたが、いずれも野生型p53存在下と変わらなかった。
p27によるがん細胞表現型の抑制機構：p27を誘導発現させたがん細胞株HT1080において、足場存在下では増殖が抑制されず、足場非存在下では抑制されることを令和４年度に論文報告した。また、p27誘導発現下で細胞遊走・浸潤・転移能が抑制されることを同年見出した。そこで、既知の転移関連遺伝子群の発現を解析したところ、足場依存的条件下で、主要転移関連因子のうち、ITGαV（細胞接着因子）、GLUT1（グルコーストランスポーター、浸潤促進因子）の発現がp27誘導発現により著しく低下することが示され、細胞接着・浸潤能がp27発現により抑制されることが示唆された。また、発育鶏卵異種移植系において、転移能そのものへのp27誘導発現の効果を解析するため、がん細胞の静脈注射による転移アッセイ系を確立した。
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