RNAスプライシングによる病気発症メカニズムの解明

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K06049
• Research Institution: Shimane University
• Principal Investigator: 尾林 栄治 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 准教授 (50321740)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 浦野 健 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 教授 (70293701)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: RNAスプライシング / 立体構造解析

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、MDSやがん患者に見られるスプライシングタンパク質のアミノ酸変異が、なぜスプライシング異常を引き起こし、病気の原因になりうるのかを明らかにすることを目的に実験を行っている。１つのアミノ酸変異の影響を知るためには、高分解能での立体構造解析が要求されるため、本研究では結晶構造解析を行う予定である。そのためには目的タンパク質の結晶を作成する必要があるために、タンパク質試料の大量調製および結晶化条件の探索を行ってきた。
目的タンパク質の１つであるU2AF1に関しては、すでに結晶化に成功しているが、高分解能での構造解析には不十分であったため、良質な結晶作成を目指してさらなる条件検索を行なっている。
また、もう１つの目的タンパク質であるZRSR2に関して、既存のドメイン部分のみでは結晶が作成できなかったため、機能未知の部分も含めた試料調製を行なった。機能未知部分を含めたZRSR2も良質な試料として精製に成功したので、この試料を用いて結晶化を進めると共に、RNA結合能など、ZRSR2の機能解析も進めて行く予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

構造解析を行う予定のタンパク質、U2AF1およびZRSR2の結晶化を試み、まだ高分解能解析に十分な結晶は得られていない。しかし、タンパク質の結晶化および最適な条件検索には時間がかかることは予想されており、想定内である。タンパク質の大量発現系および精製法の確立には成功しているので、今後も順調に研究を進めて行くことができると期待される。

Strategy for Future Research Activity

引き続き、U2AF1およびZRSR2の結晶構造解析を目指して、タンパク質の結晶化条件の検索を行なっていく。また、ZRSR2に関しては機能が不明な部分も多いので、得られた試料を用いて、配列の異なるRNA結合能を調べるなど機能解析を進めていく。
もう１つの目的であるアミノ酸変異特異的モノクローナル抗体の作成についても、積極的に進めていく予定である。