2022 Fiscal Year Research-status Report
ゴルジ体に潜みがんシグナルを発信する変異RTK ~潜伏機構の解明と新阻害法開発~
| Project/Area Number |
21K07163
|
|---|
| Research Institution | National Cancer Center Japan |
|---|
Principal Investigator |
小幡 裕希 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, ユニット長 (20609408)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| Keywords | 消化管間質細胞腫 (GIST) / KITチロシンキナーゼ / ゴルジ体 / PKD2 / マスト細胞白血病 (MCL) / 急性骨髄性白血病 (AML) / FLT3チロシンキナーゼ |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
複数種の化合物スクリーニングによって、消化管間質細胞腫 (gastrointestinal stromal tumor: GIST) のKIT変異体のゴルジ領域停留が、protein kinase Dに対するインヒビター (CRT0066101: CRT) で有意に解除されることを見出した。さらに、ノックダウンにより、哺乳細胞で確認されているPKD1-3のうち、PKD2のノックダウンのみが、CRT処理のフェノコピーとなることを明らかにした。即ち、GISTのKIT変異体のゴルジ停留は、PKD2の活性化が原因であることを見出した。ゴルジ領域において、KIT変異体は、PKD2およびエフェクター (PI4KIIIB等) を活性化し、自身を停留させていることを示唆するデータを得た。見出した分子群をインヒビターやノックダウンで機能阻害すると、KIT変異体はゴルジ領域からリリースされ、シグナル発信することができなくなることを示唆するデータを得た。さらに、ゴルジ領域からリリースされたKITは、細胞膜を経由して速やかにリソソーム内腔に移行し、分解されることを明らかにした。マスト細胞白血病 (mast cell leukemia: MCL) や急性骨髄性白血病 (acute myelogenous leukemia: AML) のKIT変異体は、ゴルジ体に停留せず、エンドソーム-リソソーム系に局在するが、それらの細胞では、PKD2とKITの機能的な相互作用および物理的結合は認められなかった。さらに、PKD2の阻害は、AMLのFLT3変異体のゴルジ停留には影響しないことが確認され、即ち、KITとPKD2の機能的相互作用は、GISTに特徴的であることが示唆される。今後、GISTのKITとPKD2の仲介分子の解析およびPKD2エフェクターの結合の詳細を明らかにし、それらがMCL, AMLではKITと相互作用しない理由についての解析に取り組みたい。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
GISTのKIT変異体のゴルジ停留の原因分子の候補としてPKD2を見出し、機能阻害実験および共免疫沈降実験を実施し、確証的なものとした。さらに、フェノコピー探索により、KITとPKD2の仲介分子, エフェクター分子群も見出しつつある。血液がんのレセプターキナーゼ変異体の局在およびシグナルにPKD2が関与しないことは意外だったが、GIST選択的な分子メカニズムの一つを明らかにできたのは意義深いものであると考えられる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
GISTのKIT変異体とPKD2の仲介分子の解析およびPKD2エフェクターの結合の詳細を明らかにする。また、分子標的薬耐性GISTにおける解析を進める。さらに、それらがMCL, AMLでは変異レセプターキナーゼと相互作用しない理由についての解析に取り組みたい。
|
| Causes of Carryover |
化合物スクリーニングを新たにおこなっており、使用する抗体, siRNAは、その結果次第で変化するため、次年度使用額が生じた。スクリーニングの結果を得次第、それらを手配する。
|
-
[Journal Article] Combination of pimitespib (TAS-116) with sunitinib is an effective therapy for imatinib-resistant gastrointestinal stromal tumors.2023
Author(s)
Teranishi R, Takahashi T, Obata Y, Nishida T, Okubo S, Kazuno H, Saito Y, Serada S, Fujimoto M, Kurokawa Y, Saito T, Yamamoto K, Yamashita K, Tanaka K, Makino T, Nakajima K, Hirota S, Naka T, Eguchi H & Doki Y
-
Journal Title
Int. J. Cancer
Volume: 152
Pages: 2580-2593
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
[Presentation] GISTに対する新規HSP90阻害薬TAS-116とマルチチロシンキナーゼの併用効果に関する検討2022
Author(s)
高橋 剛, 寺西立冴, 小幡裕希, 大久保秀一, 数野裕美, 西田俊朗, 斎藤百合奈, 山下公太郎, 西塔拓郎, 田中晃司, 山本和義, 牧野知紀, 黒川幸典, 中島清一, 江口英利, 土岐祐一郎
Organizer
第31回 日本がん転移学会学術集会
