2021 Fiscal Year Research-status Report
大腸癌肝転移に関与する癌細胞由来マイクロRNAの同定と制御するメカニズムの解明
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21K08756
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
徐 明 山口大学, 大学院医学系研究科, 学術研究員 (40645503)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中島 正夫 山口大学, 医学部附属病院, 診療助教(4日/週) (00875487)
硲 彰一 山口大学, 医学部, 教授(連携講座) (50253159)
飯田 通久 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (50554797)
吉田 晋 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (60554805)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 大腸癌肝転移 / miRNA / 同定 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、大腸がん肝転移の発生に関与する原発巣の癌細胞miRNAの同定と機能解析を行う。令和3年度、下記の実験を実施した。1.LCM法によってステージII並びにIV（肝転移）大腸癌の原発巣各々6例から癌細胞を採取し、次世代シーケンサー解析の結果からmiR-30b, miR-30c, miR-107, miR-106b, Let-7f, miR-194, miR-652を選択した。2.上記方法でステージII 並びにIV 各40例の原発巣癌細胞を採取してmiRNAを抽出し、q-PCR解析によりmiR-30b, miR-30c, miR-107, miR-106b, Let-7fはステージIV群に過剰発現することがバリデーションした。更に、患者さんの生存期間とmiRNAの発現レベルの相関性を検証してmiR-30b及びmiR-106bの2つmiRNAを同定した。3. 大腸癌細胞ライン（LOVO、SW480、WiDr、HCT116）を用いて、qPCR解析を行い細胞株にmiR-106bとmiR-30bの発現レベルを調べた。miR-106bの低い発現レベルSW480にmiR-106b mimicを、高い発現レベルWiDrにmiR-106b inhibitorを導入した。同様に、miR-30bの低い発現レベルLoVoにmiR-30b mimicを、高い発現レベルWiDrにmiR-30b inhibitorを導入した。これらの細胞を使用して;wound healing assay とinvasion assayを実行した。miR-106b及び miR-30b inhibitorは細胞遊走と浸潤を促進することが解明した。miR-106b及び miR-30b inhibitorは細胞遊走と浸潤を抑制することが解明した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初研究計画書のうち、令和3年度は大腸がん肝転移相関するmiR-106b及びmiR-30bを同定した。In vitro細胞実験でmiR-106b mimic及びmiR-30b mimicが細胞遊走と細胞浸潤を促進し、miR-106b及び miR-30b inhibitorは細胞遊走と浸潤を抑制することが解明した。以上の事より、本研究はおおむね順調に進行している、と評価する。
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| Strategy for Future Research Activity |
1.マウスモデルでmiR-106b及びmiR-30bが大腸がん肝転移の役割を調べる。
2.miR-106b 及び miR-30b が細胞の遊走と浸潤に影響のメカニズムを調べる。
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| Causes of Carryover |
1.研究用試薬をキャンペーン時購入した。２.令和3年度の日本癌学会はwebで参加した。また、未使用額については免疫染色用の抗体の購入に使用する。
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Research Products
(2 results)
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[Presentation] Identification and elucidation of liver metastasis-associated miRNAs in primary Colorectal cancer2021
Author(s)
Ming Xu, Shoichi Hazama, Michihisa Iida, Ryouichi Tsunedomi, Hiroto Matsui, Nobuaki Suzuki, Satoshi Matsukuma, Yukio Tokumitsu, Yoshitaro Shindo, Shinobu Tomochika, Yuki Nakagami, Noriko Maeda, Shin Yoshida, Shigeru Takeda, Tatsuya Ioka , Hiroaki Nagano
Organizer
日本癌学会
Int'l Joint Research
