Exploration of novel anticancer activity via bioactive lipid mediators including resolvins E2/E3

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09459
• Research Institution: Hyogo Medical University
• Principal Investigator: 鍔本 浩志 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80340975)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 上田 友子 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (50793585) ; 井上 佳代 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (80594754)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 脂質メディエーター / 腫瘍関連マクロファージ / 再分極

Outline of Annual Research Achievements

2021年に報告したCaSki細胞株を用いたイトラコナゾール投与による生理活性脂質メディエーターの変動では、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸由来のいくつかの変動が認められた。レゾルビンE2/E3が頸癌細胞より産生増加されることがわかったが、類似のレゾルビンD1/D2に腫瘍関連マクロファージを介するがん細胞増殖抑制効果が報告されており、レゾルビンE2/E3についても腫瘍関連マクロファージを介する作用を検討することとした。腫瘍関連マクロファージを樹立するため、ヒト白血病細胞由来であるTHP-1細胞からM1型、M2型マクロファージを樹立した。はじめにイトラコナゾールがそれぞれのマクロファージ自体にどのように影響するかを検討した。M2型マクロファージはイトラコナゾール投与によりM1型に再分極し頸癌細胞増殖抑制効果を示したが、マイクロアレイ解析やscRNAseq解析ではレゾルビンE2/E3に関連する遺伝子群は抽出できなかった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

腫瘍関連マクロファージ由来レゾルビン E2/E3の頸癌に対する影響を検討するため、前段階として腫瘍関連マクロファージのイトラコナゾールによる影響を検討した。腫瘍形成促進に関わるM2型マクロファージはイトラコナゾール投与により腫瘍増殖抑制に関わるM1型に変化することが、ELIZA、Western、bulky RNAseq、LC/MS、scRNAseq解析によってわかった。また、M2型マクロファージはイトラコナゾール投与により培養上清や頸癌細胞株との共培養で頸癌細胞増殖を抑制することがわかった。次に、レゾルビンDに関する発現遺伝子群の解析報告に則ってレゾルビン E2/E3の遺伝子発現群の抽出を試みたが有意な変動は認めなかった。

Strategy for Future Research Activity

頸癌CaSKi細胞とTHP-1由来腫瘍関連マクロファージとの共培養下において、イトラコナゾール投与がレゾルビンE2/E3の産生にどのように影響を与えるかを発現変動遺伝子群から解析する。また、特定臨床研究として子宮頸癌患者にイトラコナゾールを投与した前後がん組織検体を試料として保存しており、組織マイクロアレイを行い発現変動遺伝子群からレゾルビンに関わる変動遺伝子を抽出解析する。

Causes of Carryover

今年度に解析する予定のものを別予算で支出したため、次年度に行う実験の試薬の費用等に充当する予定である。

Research Products

• [Journal Article] . Itraconazole Repolarizes Tumor-associated Macrophages and Suppresses Cervical Cancer Cell Growth. (2023)
  • Author(s): Takimoto Y, Tsubamoto H, Taniguchi R, Sakata K, Takada Y, Adachi J, Tomonaga T, Ueda T, Nakagawa K, Narita S, Wakimoto YU, Shibahara H.
  • Journal Title: Anticancer Res. Volume: 43 Pages: 569ー580
  • DOI: 10.21873/anticanres.16193.
  • Peer Reviewed