2023 Fiscal Year Research-status Report
Multimodal imaging analysis of oral cancer cells focused on lysosomes
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21K10047
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Research Institution | Nagasaki University |
Principal Investigator |
角 忠輝 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (80284701)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
筑波 隆幸 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (30264055)
山口 優 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 助教 (50823308)
門脇 知子 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (70336080)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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Keywords | リソソーム / 口腔癌細胞 / マルチモーダルイメージング |
Outline of Annual Research Achievements |
癌細胞が浸潤と転移を起こすのは、リソソームが細胞外へ分泌される事と深い相関がある。近年、我々はリソソーム性タンパク質の発現レベルを抑制すると浸潤と転移が低下する事を示した。そこで本研究では、口腔癌においてリソソームがどのように細胞や生体の機能に影響を与えるかを様々なイメージングを用いて明らかにする。複数の方法を組み合わせて行うことでリソソームからの分泌がいつ、どのように起こるのかを分子から細胞、さらに個体レベルへとマクロからミクロレベルの解析を行う。本研究は不明な点が多く残されていたリソソームによる癌細胞の浸潤と転移について種々のイメージング解析を用いて解明することを目的としている。これまでの所、口腔扁平上皮癌における浸潤能の変化について解析した。口腔扁平上皮癌細胞株であるHSC2、 HSC3、HSC4、 OSC20、 SAS、Ca9-22の6種類に対して、カテプシンKの定量とカテプシンKノックダウン細胞の確立した。 令和5年度にはカテプシンK阻害薬での口腔扁平上皮癌における浸潤能の変化について調べた。口腔扁平癌細胞株6種類でのカテプシンK阻害剤であるOdanacatibを用いてコントロールと阻害薬投与細胞と比較し、浸潤能はMatrigel invasion chamberを使用して測定した。またリソソーム性プロテアーゼをどの程度分泌しているのか、カテプシン群の基質を用いて活性を測定した。さらにカテプシンK過剰発現細胞での口腔扁平上皮癌における浸潤能の変化について解析した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
口腔扁平癌細胞株6種類に対するリソソーム性プロテアーゼについて種々のカテプシン群の基質を用いて活性を測定した。現在、共焦点顕微鏡を用いて上記の口腔扁平癌細胞株にカテプシンKの動態と浸潤能との相関を検討している途中である。また、癌細胞でのリソソーム分泌機構、特にマウス担癌モデルでのリソソーム分泌と浸潤転移の蛍光イメージングについて、実験を行っている。またin vivoにおける一連の転移現象をマルチモーダルイメージングで観察している。
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Strategy for Future Research Activity |
本年度は最終年度であったが、一部の実験も途中になっていたことから、令和6年度まで延長させていただいた。順次結果が出次第まとめていく予定である。
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Causes of Carryover |
未使用が57万円余になっている。これはこれまでに購入していた試薬類を使用したことによる。このため、令和5年度新規購入する試薬類が少なかったためである。残予算は令和6年度中に解析に必要な試薬類の購入に充てる予定である。また論文投稿費やそれに付随する英語論文校正費などにも使用する予定である。
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