2022 Fiscal Year Research-status Report
Investigation of inhibitory mechanisms of ameloblastoma proliferation by benzbromarone.
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21K10058
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| Research Institution | Fukuoka Dental College |
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Principal Investigator |
森田 浩光 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 教授 (30380463)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉住 潤子 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 講師 (40596376)
吉本 尚平 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 講師 (70780188)
松崎 英津子 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 教授 (20432924)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | エナメル上皮腫 / アポトーシス / スフェロイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、エナメル上皮腫に対するbenzbromaroneによる細胞死の作用機序をin vitro（遺伝子レベル、細胞レベルおよび組織レベル）およびin vivo（ヌードマウスへのオルガノイド移植による生体内での効果）で解明することである。初年度となる令和3年度は研究遂行により以下の成果を得た。
1. エナメル上皮腫細胞を用いたbenzbromaroneによる細胞死についての基礎医学的検討：エナメル上皮腫細胞（AM-1）でのbenzbromarone受容は、尿酸トランスポーターの一種であるSLC2A9を介したものと考えていたが、その後の研究により、細胞増殖に関与すると考えられているEYA（eyes absent family遺伝子）によるものである可能性が高いと考えられた。一方、AM-1を基に作製したオルガノイド（スフェロイド）に対してbenzbromarone投与により、caspase3の活性化を伴
うアポトーシスが引き起こされることが明らかとなった。
2. 病理切片を用いたbenzbromaroneが作用する受容体の病理組織学的検討：エナメル上皮腫の病理切片からRNAを抽出し、それを用いて発現解析を行った結果、EYA-1が高発現していることが明らかとなった。
3. ヌードマウスへのオルガノイド移植によるin vivo研究：本実験に関しては、これまでできる限りエナメル上皮腫の生育環境と類似させるためにヌードラット顎骨への移植を試みたが移植片（オルガノイド）が生着しなかったため、過去に報告のあるヌードマウスを頭頂部皮下に移植する方法に切り替え、in vivo実験を行っていくこととした。
4. エネメル上皮種のマーカー検索として、新たに唾液中のEYA関連のmiRNAについての調査を行うこととした。現在、エナメル上皮種患者8名、健常者20名から唾液提供を受け、解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
新型コロナ感染症の影響で、研究時間の縮小や学生講義対応に追われ、実験遂行の時間を確保できなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
1. エナメル上皮腫細胞を用いたbenzbromaroneによる細胞死についての基礎医学的検討：エナメル上皮腫細胞（AM-1）における細胞増殖へのEYA（eyes absentfamily遺伝子）の関与及びサブタイプの特定、またbenzbromarone投与によるcaspase3の活性化を伴うアポトーシスの詳細について調査する。
2. 病理切片を用いたbenzbromaroneが作用する受容体の病理組織学的検討：エナメル上皮腫によるEYAのサブタイプ同定と病理組織内分布について検討する。
3. ヌードマウスへのオルガノイド移植によるin vivo研究：ヌードマウスの頭頂部皮下にAM-1により作製したスフェロイドを移植し、benzbromaroneの生体内投与での効果を観察する。
以上の結果に基づき、次年度も継続してbenzbromaroneが作用する受容体の特定と細胞死の際に働く細胞内シグナル伝達の全容および細胞増殖に対する尿酸の関与について明らかにする。
4. エナメル上皮腫患者および健常者の唾液中EYA関連miRNAの調査を行い、エナメル上皮種のマーカー検索を行う。
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| Causes of Carryover |
COVID-19対応等により実験遂行が十分にできなかったため、次年度の消耗品費（実験動物費および抗体や各種実験用キット等の費用）として使用することとした。
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[Journal Article] Epipharyngeal Abrasive Therapy down-regulates the expression of Cav1.2: A key molecule in Influenza virus entry.2022
Author(s)
Nishi K, Yoshimoto S, Nishi S, Nishi T, Nishi R, Tsunoda T, Morita H, Tanaka H, Hotta O, Yasumasu S, Hiromatsu K, Shirasawa S, Nakagawa T, Yamano T.
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Journal Title
In Vivo
Volume: 36
Pages: 2357-2364
DOI
Peer Reviewed
