Isolation of cancer stem cells of HCC from blood samples and clarification of drug resistance

2022 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 21K16418
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 55020:Digestive surgery-related
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: Hideo Tomihara 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (30724231)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 癌幹細胞 / 肝細胞癌 / 血中循環腫瘍細胞 / PMEAコーティング

Outline of Final Research Achievements

Using PMEA coated slides which exclude blood cells and attach to cancer cells, we established a method by which circulating tumor cells (CTC) from patients with hepatocellular carcinoma (HCC) could be efficiently captured. In two years, 11 HCC cases were examined and CTC was detected in all cases (4-40 cells/ 20ml blood samples : median 14). After incubation in ES medium for 7-10 days, spheroid like structures were recovered. In the first cases, RNA contents were readily degraded because of minimal cell number. Using newly developed semi-quantitative PCR for small cell population, RNA contents could eventually be measured.

Free Research Field

医学、消化器外科学

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

肝細胞癌の予後は未だ不良で治療も十分とはいえない。治療抵抗性の原因として癌幹細胞の関与が考えられている。本研究では、手術に比べてはるかに低侵襲な採血だけで、肝細胞癌を捉え、癌幹細胞を培養することで、その性質を分析し治療に応用することを目的として、11人の癌患者からの血液サンプルを分析した。血液中から少数の癌細胞をうまく捉え、それを増殖させて癌幹細胞を捉える、更に分子生物学的に分析するといった各ステップで大きなハードルがあったが、種々の工夫によってクリアできた。本研究の成果は癌患者の血液からリアルタイムに癌細胞を採取し分析する方法を確立したもので、医学的、学術的にも大きな成果である。