2021 Fiscal Year Research-status Report
非アルコール性脂肪性肝疾患の治療に資するホスホリパーゼCの解明
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21K19327
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
河野 望 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 准教授 (50451852)
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| Project Period (FY) |
2021-07-09 – 2023-03-31
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| Keywords | ホスホリパーゼC / ホスファチジルイノシトール / 非アルコール性脂肪性肝疾患 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
LPIAT1を欠損したHuh-7細胞は、LPIAT1欠損マウス肝臓と同様にアラキドン酸含有PI の減少とオレイン酸含有PI の増加、中性脂質の蓄積がみられる。この細胞に[14C]グリセロールを添加し、[14C]ラベルされたPI の分解を経時的に調べると、LPIAT1 KO 細胞では野生型に比べてPI の分解が顕著に亢進する。この細胞レベルでのPI 分解アッセイを利用して、RNAi スクリーニングをおこなった。本年度はRNAi する候補分子として、Huh-7で発現が確認されたPLCファミリー（PLCb1, PLCb2, PLCb3, PLCb4, PLCd1, PLCd3, PLCd4, PLCg1, PLCg2, PLCe1, PLCh1, PLCh2, PLCz）、PI-PLC活性が報告されているPLCXDファミリー（PLCXD1~3）および SMSr、およびPIサイクルに関わるNir2, Nir3を対象とした。その結果、どの遺伝子の発現抑制によってもLPIAT1 KO細胞での[14C]PIの分解が抑制されなかった。以上から、LPIAT1 KO細胞でPIの分解を担う分子は既知のPI-PLCではないことが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究室で起きた火災のため研究が中断し、計画していたRNAi実験の一部と阻害剤の実験ができなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
候補分子のRNAi実験と阻害剤の実験をおこない、LPIAT1 KO細胞でPIの分解を担う分子の同定を目指す。またクリックケミストリーを用いたPIの分解を可視化する方法を導入し、網羅的なスクリーニングを行う準備をする。
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| Causes of Carryover |
研究室で起きた火災の復旧に時間を要したため、今年度の計画が次年度に後ろ倒しとなり、次年度使用額が生じた。
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