iPS細胞を用いた難治性呼吸器疾患の病態解明と新規治療法の開発

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22249031
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 三嶋 理晃 京都大学, 医学研究科, 教授 (60190625)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 新実 彰男 京都大学, 医学研究科, 准教授 (30252513) ; 平井 豊博 京都大学, 医学研究科, 講師 (20359805) ; 室 繁郎 京都大学, 医学研究科, 院内講師 (60344454) ; 松本 久子 京都大学, 医学研究科, 助教 (60359809) ; 星野 勇馬 京都大学, 医学研究科, 助教 (00378746)
• Keywords: 疾患特異的iPS / 肺胞上皮細胞 / 特発性間質性肺炎 / 若年性肺気腫 / リンパ脈管筋腫症 / Birt-Hogg-Dube症候群

Research Abstract

(iPS細胞から様々な疾患関連の細胞種への分化誘導因子の同定)
マウスiPS細胞を用い、ES細胞の既報に基づき、肺胞II型上皮細胞の分化誘導を試みた。胚様体形成後、無血清培地下で培養することにより、サーファクタント蛋白SP-C発現が亢進し、肺胞II型上皮細胞の分化が促進された。内胚葉への分化を促進するactivin Aの添加では、有意なSP-C発現の亢進は認めなかった。またiPS細胞の単層培養ではII型上皮細胞への分化促進は見られなかった。
以下の方法で樹立したヒトiPS細胞を用いて、同様な検討を行った。マウス細胞と同様に胚葉体形成後、無血清培地下に置くことで、有意なSP-C発現亢進を認めた。
一方効率的な肺胞II型上皮細胞選別法として、ヒトiPS細胞のSP-Cプロモータに薬剤耐性遺伝子を導入する方法を試みた。これにより、iPS由来のSP-C産生細胞を単離することが可能となった。
(疾患症例、薬剤・放射性肺障害患者からのiPS細胞作成～バンク作り)
間質性肺炎25例、喘息及びCOPDを有する肺癌4症例、及び対照としてこれらの疾患を有しない肺癌6症例、計25例より、同意取得の上、外科的肺生検若しくは肺切除術の際に皮膚及び肺組織を採取し、線維芽細胞株を樹立した。うち5例(それぞれ肺及び皮膚由来、計10検体)において疾患iPS細胞を樹立した。得られたiPS細胞は、コロニーの性状及びtransgene silencingをもとに品質管理を行い凍結保存した。稀少疾患LAM及びBirt-Hogg-Dube症候群の症例に関しては、順天堂大学呼吸器内科との共同研究として進めるべく、倫理委員会への申請作業を行った。

Research Products

• [Journal Article] To authors reply. invasive mechanical ventilation in patients with idiopathic pulmonary fibrosis or idiopathic non-specific interstitial pneumonia (2011)
  • Author(s): Tomii K, Tachikawa R, Chin K, Murase K, Handa T, Mishima M, Ishihara K
  • Journal Title: Intern Med Volume: 50(2) Pages: 175
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Association of the transforming growth factor β1 promoter polymorphism, C-509T, with smoking status and survival in advanced non-small cell lung cancer. Oncol Rep (2011)
  • Author(s): Togashi Y, Masago K, Fujita S, Kim YH, Sakamori Y, Hatachi Y,Fukuhara A, Nagai H, Mio T, Mishima M
  • Journal Title: Oncol Rep Volume: 25(2) Pages: 377-382
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Genetic polymorphisms in the endothelial nitric oxide synthase gene correlate with overall survival in advanced non-small-cell lung cancer patients treated with platinum-based doublet chemotherapy (2010)
  • Author(s): Fujita S, Masago K, Hatachi Y, Fukuhara A, Hata A, Kaji R, Kim YH, Mio T, Mishima M, Katakami N
  • Journal Title: BMC Med Genet Volume: 11 Pages: 167
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Mechanisms of Enhanced Ca2+ Oscillation Frequency by Interleukin-13 in Airway Smooth Muscle Cells (2010)
  • Author(s): H.Matsumoto, Y.Hirata, K.Otsuka, A.Niimi, I.Ito, T.Iwata, E.Ogawa, S.Muro, H.Sakai, K.Chin, Y.Oku, M.Mishima
  • Organizer: ATS2010
  • Place of Presentation: Colorado
  • Year and Date: 20100514-20100519