イネーブロモウイルス間相互作用における特異性決定メカニズムの解明

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22380030
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 三瀬 和之 京都大学, 農学研究科, 准教授 (90209776)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 奥本 裕 京都大学, 農学研究科, 教授 (90152438)
• Keywords: 植物ウイルス / イネ / プロモウイルス / 交雑系統 / 全身感染 / 病徴 / プロトプラスト / サイレンシング

Research Abstract

(A)植物因子(B)ウイルス因子(C)サイレンシング系の3プロジェクトを推進した。A-1)抗BMV抗体を用いた免疫学的検出法であるドットブロット法とELISA法によってBMV感染イネを正確、迅速、大量に検出できる系を構築できた。A-2)農業生物資源研究所のリソースセンターを始めとする数カ所の研究所において整備されている種々のイネ交雑系統を遺伝解析に用いるため、まずそれらの交配親におけるBMVの感染性を調査した。その結果、インド型品種のハバタキ、IR24や密陽23号で効率良く全身感染し、日本型品種のコシヒカリ、ササニシキ、アソミノリ、アキヒカリでは全く感染が見られなかった。この結果、既存の染色体断片置換系統群やリコンビナント自殖系統群が利用できることが分かった。B-1)BMV-F系統がイネに感染したことから、他の入手可能なBMV系統についてもイネにおける感染性を調査した結果、複数の系統で感染性や病徴に差はあるものの全身感染が見られた。B-2)BMV-F系統に感受性のIR64のプロトプラストを用いた感染系を確立できた。イネ品種IR64に感染するBMV-Fと感染しないBMV-KU2はともに一細胞において少なくとも複製することが確認された。これら2系統間でキメラウイルスを作成し調査した結果、RNA2の違いがイネにおける全身感染に重要であることが明らかとなった。B-3)病徴を誘導するBMV-F系統と誘導しないBMV-PV180系統を定量実験に供した結果、病徴発現と増殖量に相関があることが明らかとなった。C-1)さらに種々のBMV系統を複数のインド型品種に接種し、増殖量と病徴の関係を詳しく調べた結果、増殖量と病徴発現には相関があることが判明した。全身感染するものの弱い病徴しかし示さないBMV系統を選抜し、サイレンシングベクター化の準備を始めた。

Research Products

• [Journal Article] Template recognition mechanisms by replicase proteins differ between bipartite positive-strand genomic RNAs of a plant virus (2011)
  • Author(s): Iwakawa, H.-O., Mine, A., Hyodo, K., An, M., Kaido, M., Mise, K., and Okuno, T.
  • Journal Title: J. Virol Volume: 85(1) Pages: 497-509
  • DOI: DOI:10.1128/JVI.01754-10
• [Journal Article] Viral cell-to-cell movement requires formation of cortical punctate structures containing Red clover necrotic mosaic virus movement protein (2011)
  • Author(s): Kaido, M., Funatsu, N., Tsuno, Y., Mise, K., Okuno, T.
  • Journal Title: Virology Volume: 413 Pages: 205-215
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of amino acids in auxiliary replicase protein p27 critical for its RNA-binding activity and the assembly of the replicase complex in Red clover necrotic mosaic virus (2011)
  • Author(s): Hyodo, K., Mine, A., Iwakawa, H.-O., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Journal Title: Virology Volume: 413 Pages: 300-309
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification and characterization of the 480 kDa template-specific RNA-dependent RNA polymerase complex of Red clover necrotic mosaic virus (2010)
  • Author(s): Mine, A., Takeda, A., Taniguchi, T., Taniguchi, H., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Journal Title: Journal of Virology Volume: 84 Pages: 6070-6081
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A Y-shaped RNA structure in the 3' untranslated region together with the trans-activator and core promoter of Red clover necrotic mosaic virus RNA2 is required for its negative-strand RNA synthesis (2010)
  • Author(s): An, M., Iwakawa, H.-O., Mine, A., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Journal Title: Virology Volume: 405 Pages: 100-109
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Interactions between p27 and p88 replicase proteins of Red clover necrotic mosaic virus play an essential role in viral RNA replication and suppression of RNA silencing via the 480-kDa viral replicase complex assembly (2010)
  • Author(s): Mine, A., Hyodo, K., Takeda, A., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Journal Title: Virology Volume: 407 Pages: 213-224
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Heat shock protein 70(Hsp70)はRed clover necrotic mosaic virus(RCNMV)のRNA複製酵素複合体の形成を制御している (2011)
  • Author(s): 峯彰・谷口貴子・海道真典・三瀬和之・谷口寿章・奥野哲郎
  • Organizer: 平成23年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 府中市、東京農工大学府中キャンパス
  • Year and Date: 2011-03-27
• [Presentation] Melandrium yellow fleck virus (MYFV) RNA3の5'非翻訳領域(UTR)の変異はウイルス外被タンパク質(CP)の翻訳に影響を与える (2011)
  • Author(s): 楢林大樹・海道真典・三瀬和之・奥野哲郎
  • Organizer: 平成23年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 府中市、東京農工大学府中キャンパス
  • Year and Date: 2011-03-27
• [Presentation] 2a複製酵素タンパク質遺伝子内のミスセンス変異はBrome mosaic virus (BMV)のイネにおける全身感染能を付与する (2011)
  • Author(s): 新田浩志・鷲津充彦・楢林大樹・海道真典・奥野哲郎・奥本裕・三瀬和之
  • Organizer: 平成23年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 府中市、東京農工大学府中キャンパス
  • Year and Date: 2011-03-27
• [Presentation] Auxiliary replicase protein p27 of Red clover necrotic mosaic virus plays multiple roles in an early replication process (2010)
  • Author(s): Hyodo, K., Mine, A., Iwakawa, H.-O., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Organizer: 第33回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸市、神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-09
• [Presentation] A novel regulation mechanism of viral gene expression via the interaction between genomic and subgenomic RNA (2010)
  • Author(s): Narabayashi, T., Kaido, M., Okuno, T., Mise, K.
  • Organizer: 第33回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸市、神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-09
• [Presentation] Kissing interaction across 2500 bases is required for efficient-1 ribosomal Frameshifting in Red clover necrotic mosaic virus RNA1 (2010)
  • Author(s): Tajima, Y., Iwakawa, H.-O., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Organizer: 第33回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸市、神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2010-12-08
• [Presentation] ゲノムーサブゲノム間相互作用による新規なウイルス遺伝子発現制御機構 (2010)
  • Author(s): 楢林大樹・海道真典・奥野哲郎・三瀬和之
  • Organizer: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 徳島市、あわぎんホール
  • Year and Date: 2010-11-09
• [Presentation] Red clover necrotic mosaic virus RNA複製酵素タンパク質p27はウイルスRNAの初期複製段階において様々な役割を担っている (2010)
  • Author(s): 兵頭究・峯彰・岩川弘宙・海道真典・三瀬和之・奥野哲郎
  • Organizer: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 徳島市、あわぎんホール
  • Year and Date: 2010-11-09
• [Presentation] Mutations in the 5'untranslated region of Melandrium yellow fleck bromovirus RNA3 affect translation of the coat protein gene (2010)
  • Author(s): Narabayashi, T., Kaido, M., Okuno, T., Mise, K.
  • Organizer: 第29回アメリカウイルス学会年会
  • Place of Presentation: 米国,モンタナ州,ボーズマン,モンタナ州立大学
  • Year and Date: 2010-07-18
• [Presentation] RNA binding activity of Red clover necrotic mosaic virus replication protein p27 plays important roles in the early replication steps of viral genomic RNA2 (2010)
  • Author(s): Hyodo, K., Mine, A., Iwakawa, H.-O., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Organizer: 第29回アメリカウイルス学会年会
  • Place of Presentation: 米国,モンタナ州,ボーズマン,モンタナ州立大学
  • Year and Date: 2010-07-18
• [Presentation] Analysis of long-distance RNA-RNA interaction required for an efficient-1 ribosomal frameshifting in Red clover necrotic mosaic virus RNA1 (2010)
  • Author(s): Tajima, Y., Iwakawa, H.-O., Kaido, M., Mise, K., Okuno, T.
  • Organizer: 第29回アメリカウイルス学会年会
  • Place of Presentation: 米国,モンタナ州,ボーズマン,モンタナ州立大学
  • Year and Date: 2010-07-18
• [Presentation] Poly(A)結合タンパク質(PABP)はRed clover necrotic mosaic virus (RCNMV) RNA1の3'非翻訳領域(UTR)に結合しcap/poly(A)非依存的翻訳を促進する (2010)
  • Author(s): 岩川弘宙・谷口貴子・谷口寿章・海道真典・三瀬和之・奥野哲郎
  • Organizer: 平成22年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 京都市、国立京都国際会館
  • Year and Date: 2010-04-20
• [Presentation] Red clover necrotic mosaic virusのRNA合成を担う480 kDa複合体の同定と性状解析 (2010)
  • Author(s): 峯彰・谷口貴子・谷口寿章・海道真典・三瀬和之・奥野哲郎
  • Organizer: 平成22年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 京都市、国立京都国際会館
  • Year and Date: 2010-04-19
• [Presentation] Red clover necrotic mosaic virus (RCNMV) RNA1の効率良い-1フレームシフト翻訳に必要なRNA-RNA長距離相互作用の解析 (2010)
  • Author(s): 田島由理・岩川弘宙・海道真典・三瀬和之・奥野哲郎
  • Organizer: 平成22年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 京都市、国立京都国際会館
  • Year and Date: 2010-04-19
• [Presentation] Red clover necrotic mosaic virus RNA複製酵素成分タンパク質p27のRNA結合活性はウイルスゲノムRNA2の複製初期段階に必要である (2010)
  • Author(s): 兵頭究・峯彰・岩川弘宙・海道真典・三瀬和之・奥野哲郎
  • Organizer: 平成22年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 京都市、国立京都国際会館
  • Year and Date: 2010-04-19
• [Presentation] Melandrium yellow fleck virus (MYFV) RNA3の5'非翻訳領域(UTR)の変異はウイルス外被タンパク質(CP)の翻訳に影響を与える (2010)
  • Author(s): 楢林大樹・海道真典・奥野哲郎・三瀬和之
  • Organizer: 平成22年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 京都市、国立京都国際会館
  • Year and Date: 2010-04-19