2012 Fiscal Year Annual Research Report
新規がん幹細胞モデルマウスの作製とＭＬＬ関連白血病発生の分子基盤
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22390206
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
野阪 哲哉 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30218309)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (20282527)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | MLL / 白血病幹細胞 / がん幹細胞 / 造血幹細胞 / 白血病モデルマウス / PLZF |
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| Research Abstract |
Cre リコンビナーゼとloxP配列を用い、MLL-ENL遺伝子が誘導発現するトランスジェニックマウスを作製した。このトランスジェニックマウスの骨髄細胞からCD34-KSL分画(造血幹細胞)とCD34+KSL分画(造血前駆細胞)を単離し、Cre発現レトロウイルスを感染させて、それらの細胞集団にMLL-ENLを誘導発現させ、colony 継代assayを行ったところ、MLL-ENLは造血幹細胞のみをtransformした。そして、cDNA microarray解析により、造血幹細胞特異的に発現している遺伝子PLZFを同定した。PLZFノックダウン実験では、MLL-ENLが造血幹細胞をtransformする活性が低下した。同様の現象はin vivoの二次移植実験においても観察された。さらに、野生型PLZF遺伝子を強制発現すると、マウス骨髄細胞が不死化され、ポリコーム分子Bmi-1との相互作用が消失する変異体では不死化は起こらなかった。また、PLZFプロモーターを用いたレポーターassayによりMLL-ENL発現がPLZF転写を増強すること、公共データベース上のヒト白血病細胞における遺伝子発現プロファイル解析（GSEA）にてPLZF強発現のMLL関連AMLは造血幹細胞に近いプロファイルを持つことを明らかにした。以上の結果は、MLL-ENLによる造血幹細胞のtransformationにおいて、PLZFが重要な役割を果たしていることを示唆する。さらに、MLL-ENLにより発現が増強する別の造血幹細胞特異的発現遺伝子Bにも着目し、当該遺伝子のコンディショナルノックアウトマウスを作製した。現在Floxedホモの状態で、Cre誘導の準備完了である。この遺伝子Bのノックアウト細胞を用いた骨髄移植実験にてMLL-ENLによる造血幹細胞のがん化における遺伝子Bの役割を解析予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Manipulation of human early T lymphopoiesis by coculture on human bone marrow stromal cells: Potential utility for adoptive immunotherapy.2013
Author(s)
Liu B, Ohishi K, Orito Y, Nakamori Y, Nishikawa H, Ino K, Suzuki K, Matsumoto T, Masuya M, Hamada H, Mineno J, Ono R, Nosaka T,Shiku H, Katayama N.
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Journal Title
Exp Hematol
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Molecular genotyping of Mycobacterium tuberculosis in Mie Prefecture, Japan, using variable numbers of tandem repeats analysis.2012
Author(s)
Nagai Y, Iwade Y, HayakawaE, Nakano M, Sakai T, Tanuma M, Katayama M, Nosaka T, Yamaguchi T.
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Journal Title
Jpn J Infect Dis
Volume: 65
Pages: 341-344
Peer Reviewed
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[Presentation] MLL fusion genes transform hematopoietic stem cells through an aberrant self-renewal program by Plzf.
Author(s)
Ono R, Masuya M, Nakajima H, Enomoto Y, Miyata E, Nakamura A, Ishii S, SuzukiK, Katayama N, Kitamura T, Nosaka T.
Organizer
第74回日本血液学会学術集会
Place of Presentation
京都
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