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2012 Fiscal Year Annual Research Report

Na/K比に依存しないヨーロッパ腐蛆病菌の増殖を可能にした原因遺伝子の同定

Research Project

Project/Area Number 22580345
Research Institution独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構

Principal Investigator

高松 大輔  独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究所・細菌・寄生虫研究領域, 主任研究員 (60414728)

Project Period (FY) 2010-10-20 – 2013-03-31
Keywordsミツバチ / ヨーロッパ腐蛆病 / 培養性状 / Na+排出ポンプ
Research Abstract

Melissococcus plutoniusはミツバチの健康を脅かすヨーロッパ腐蛆病の原因菌である。本菌の培養にはカリウム塩を添加した低Na+高K+培地が必要であり、高Na+低K+培地には発育しないとされている。しかし、我が国には高Na+低K+培地にも発育するM. plutonius株(非典型株)が存在することが明らかとなったため、本課題では「M. plutonius非典型株の高Na+低K+培地での増殖を可能にした遺伝的背景を特定し、その情報を正確なヨーロッパ腐蛆病診断に役立てること」を目的として研究を行った。
最終年度では、これまでの研究の結果見つかったNa+排出ポンプ遺伝子の変異が典型株におけるカリウム塩要求性に関与していることを証明するため、活性型のcation-transporting ATPase遺伝子またはNa+/H+ antiporter遺伝子を野外で分離された典型株に導入し、高Na+低K+培地でも発育することを確認した。
期間全体を通じた研究の結果、国内のM. plutonius株には、Na+排出ポンプ遺伝子が不活化されている典型株と正常な非典型株が存在することが明らかになった。通常、生物は細胞内を低Na+高K+に維持することで正常な生命活動を行っている。Na+排出ポンプは細胞内から細胞外にNa+を排出することで、細胞内を低Na+高K+状態を維持していると推測されている。そのため、Na+をくみ出せない典型株はカリウム塩を多量に添加した低Na+高K+培地内でのみ、自らの細胞内を低Na+高K+濃度に維持でき、増殖できるのだろうと考えられる。
以上の結果から、日本国内には上記の様な遺伝的背景の違いから、カリウム塩要求性の異なる M. plutonius株が存在していることが明らかとなり、より正確なヨーロッパ腐蛆病の診断に貢献する重要な知見となった。

Current Status of Research Progress
Reason

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (9 results)

All 2013 2012

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (6 results)

  • [Journal Article] Identification of mutations involved in the requirement of potassium for growth of typical Melissococcus plutonius strains2013

    • Author(s)
      Daisuke Takamatsu, Rie Arai, Tohru Miyoshi-Akiyama, Kayo Okumura, Masatoshi Okura, Teruo Kirikae, Atsuko Kojima, Makoto Osaki
    • Journal Title

      Applied and Environmental Microbiology

      Volume: (印刷中)

    • DOI

      DOI:10.1128/JB.05151-11

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characterization of bifidobacteria in the digestive tract of the Japanese honeybee, Apis cerana japonica2013

    • Author(s)
      Meihua Wu, Yuya Sugimura, Noriko Takaya, Daisuke Takamatsu, Masaru Kobayashi, DeMar Taylor, Mikio Yoshiyama
    • Journal Title

      Journal of Invertebrate Pathology

      Volume: 112 Pages: 88-93

    • DOI

      10.1016/j.jip.2012.09.005.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Complete genome sequence of Melissococcus plutonius DAT561, a representative strain of an endemic cluster in Japan, showing unusual growth profile2012

    • Author(s)
      Kayo Okumura, Rie Arai, Masatoshi Okura, Teruo Kirikae, Daisuke Takamatsu, Makoto Osaki, Tohru Miyoshi-Akiyama
    • Journal Title

      Journal of Bacteriology

      Volume: 194 Pages: 3014

    • DOI

      10.1128/JB.00437-12.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] ヨーロッパ腐蛆病菌( Melissococcus plutonius)典型株・ 非典型株識別用Duplex PCR法の開発2013

    • Author(s)
      荒井理恵, 奥村香世, 秋山徹, 森永結子, 呉梅花, 芳山三喜雄, 大倉正稔, 高松大輔
    • Organizer
      第155回日本獣医学会学術大会
    • Place of Presentation
      東京大学駒場キャンパス
    • Year and Date
      20130328-20130330
  • [Presentation] ミツバチ腐蛆病菌に増殖抑制効果を有するバクテリオシンの解析2013

    • Author(s)
      芳山三喜雄, 杉村祐哉, 木村澄, 呉梅花, 亀山眞由美, 高松大輔
    • Organizer
      第57回日本応用動物昆虫学会大会
    • Place of Presentation
      日本大学生物資源科学部
    • Year and Date
      20130327-20130329
  • [Presentation] ミツバチ腐蛆病菌抑制効果を有するプロバイオティクス乳酸菌の解析2013

    • Author(s)
      杉村祐哉, 高松大輔, 芳山三喜雄
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年度大会
    • Place of Presentation
      東北大学
    • Year and Date
      20130324-20130328
  • [Presentation] Melissococcus plutonius典型株・ 非典型株識別用Duplex PCR法の開発2013

    • Author(s)
      高松大輔, 大倉正稔, 奥村香世, 秋山徹
    • Organizer
      第86回日本細菌学会総会
    • Place of Presentation
      幕張メッセ
    • Year and Date
      20130318-20130320
  • [Presentation] Phenotypic and genetic diversity of Melissococcus plutonius isolates from honeybee larvae in Japan and experimental reproduction of European foulbrood by cultured bacteria2012

    • Author(s)
      Daisuke Takamatsu, Rie Arai, Kiyoshi Tominaga, Meihua Wu, Masatoshi Okura, Kazutomo Ito, Naomi Okamura, Hidetaka Onishi, Makoto Osaki, Yuya Sugimura, Mikio Yoshiyama
    • Organizer
      ASM2012, 112th General Meeting of the American Society for Microbiology
    • Place of Presentation
      Moscone Center, San Francisco, USA
    • Year and Date
      20120616-20120619
  • [Presentation] Diversity of Melissococcus plutonius Isolates from Honeybee Larvae in Japan2012

    • Author(s)
      Daisuke Takamatsu, Rie Arai, Kiyoshi Tominaga, Meihua Wu, Masatoshi Okura, Kazutomo Ito, Naomi Okamura, Hidetaka Onishi, Makoto Osaki, Yuya Sugimura, Mikio Yoshiyama
    • Organizer
      Thailand-Japan Joint Conference on Animal Health 2012: The 25th Year Anniversary of National Institute of Animal Health
    • Place of Presentation
      Rama Gardens Hotel, Bangkok, Thailand
    • Year and Date
      20120530-20120531

URL: 

Published: 2014-07-24  

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