翻訳リボゾーム親和精製法による弓状核におけるインスリンシグナルの標的遺伝子の同定

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22590995
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 中江 淳 慶應義塾大学, 医学部, 准教授 (00344573)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 川野 義長 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (80571463)
• Keywords: AGRPニューロン / PDK1 / Foxo1 / TRAP法 / 遺伝子発現 / リボソーム蛋白

Research Abstract

我々は、これまでAGRPニューロンにおける3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 (PDK1)のノックアウトマウス(AGRPPdk1^<-/->)が、コントロールマウスに比べ、エネルギー消費、行動量の増加、体重の低下を示し、同ニューロンでの転写活性抑制型FoxO1(△256FoxO1)の過剰発現が、その表現型を抑制することを報告した(PLoS ONE 6(4):el8324.doi:10.1371/journal.pone.0018324)。しかしながら、Pdk1-Foxo1のAGRPニューロンにおける標的遺伝子の同定には至らなかった。本研究では、PDK1のノックアウトおよび転写活性抑制型FoxO1の過剰発現による同ニューロンの遺伝子発現の変化をニューロン特異的に解析し、PDK1-Foxo1経路の標的遺伝子を同定することを目的とした。当該年度において、直接にAGRPニューロンの遺伝子発現解析を目的に可能にする方法として、Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP)法を確立するため、まず、EGFPとlarge-subunit ribosomal protein L10aのN末端との融合蛋白をAGRPニューロン特異的に発現させるトランスジェニックマウスの作製を試みた。現在1ラインが、陽性であることを、確認し、AGRP-Creトランスジェニックマウスと掛け合わせ、両マウスのダブルミュータントマウスを得ている。今後、AGRPニューロン特異的なEGFP-L10a蛋白の発現を、免疫染色により、確認する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Crosstalk between glucocorticoid receptor and nutritional sensor mTOR in skeletal muscle. (2011)
  • Author(s): Shimizu N, Yoshikawa N, Ito N, Maruyama T, Suzuki Y, Takeda S, Nakae J, Tagata Y, Nishitani S, Takehana K, Sano M, Fukuda K, Suematsu M, Morimoto C, Tanaka H.
  • Journal Title: Cell Metab Volume: 13 Pages: 170-182
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PDK1-Foxo1 in Agouti-Related Peptide Neurons Regulates Energy Homeostasis by Modulating Food Intake and Energy Expenditure. (2011)
  • Author(s): Cao Y, Nakata M, Okamoto S, Takano E, Yada T, Minokoshi Y, Hirata Y, Nakajima K, Iskandar K, Hayashi Y, Ogawa W, Barsh GS, Hosoda H, Kangawa K, Itoh H, Noda T, Kasuga M, Nakae J.
  • Journal Title: PLoS ONE Volume: 6 Pages: e18324
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PDK1/FoxO1 pathway in POMC neurons regulates Pomc expression and food intake. (2010)
  • Author(s): Iskandar K, Cao Y, Hayashi Y, Nakata M, Takano E, Yada T, Zhang C, Ogawa W M, Oki M, Chua S Jr, Itoh H, Noda T, Kasuga M, Nakae J.
  • Journal Title: Am J Physiol Endocrinol Metab. Volume: 298 Pages: E787-798
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Deacetylation of FoxO by Sirt1 plays an essential role in mediating starvation-induced autophagy in cardiac myocytes. (2010)
  • Author(s): Hariharan N, Maejima Y, Nakae J, Paik J, Depinho RA, Sadoshima J.
  • Journal Title: Circ Res. Volume: 107 Pages: 170-182
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Overexpression of FoxO1 in adipose tissue macrophages induces insulin resistance. (2010)
  • Author(s): Nakae J, Kawano Y, Sekioka R, Fujisaka S, Tobe K, Itoh H.
  • Organizer: FASEB Summer Research Conferences. AMPK : Central Regulatory System in Metaholism & Growth.
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2010-10-04
• [Presentation] マクロファージにおけるFox01はCcr2発現を誘導しインスリン抵抗性を惹起しうる (2010)
  • Author(s): 川野義長、関岡理沙、藤坂志帆、戸辺一之、伊藤裕、中江淳
  • Organizer: 第31回日本肥満学会
  • Place of Presentation: 前橋
  • Year and Date: 2010-10-02
• [Presentation] 脂肪組織マクロファージにおけるFox01の機能解析 (2010)
  • Author(s): 川野義長、関岡理沙、藤坂志帆、戸辺一之、伊藤裕、中江淳
  • Organizer: 第15回アデイポサイエンス研究会シンポジウム
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2010-08-21
• [Presentation] ノックアウトマウスを用いたFoxO1結合蛋白P13の生理作用の検討 (2010)
  • Author(s): 中江淳、川野義長、関岡理沙、伊藤裕
  • Organizer: 第53回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: 岡山
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Book] インスリン作用とFoxo1.糖尿病ナビゲーター (2010)
  • Author(s): 中江淳、伊藤裕
  • Total Pages: 4
  • Publisher: メデイカルレビュー社