2010 Fiscal Year Annual Research Report
c-mycを標的腫瘍抗原とした固形癌診断血清抗体診断法の研究
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22591416
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
山崎 有浩 東邦大学, 医学部, 講師 (00307761)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
島田 英昭 東邦大学, 医学部, 教授 (20292691)
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| Keywords | SEREX / VEGF / p53 / ELISA / 固形癌 / 血清抗体 / 腫瘍マーカー |
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| Research Abstract |
(1) c-myc cDNAの塩基配列をアミノ酸配列に変換し、MHCPredウェブサイト(http:〃www.jenner.ac.uk/MHCPred/)を用いてクラスII抗原部位を検索し、その領域を含むペプチドを人工合成する。始めにウエスタンブロット法にて、c-mycを標的とする血清抗体陽性率を検討する。次に、アミノ末端にビオチンを付加しておき、予めアビジンを固相化したプレートを用いて合成ペプチドを特異的に結合させ、洗浄後に血清抗体と反応させ、ペルオキシダーゼ標識抗ヒトIgG抗体を用いて血清抗体レベルを測定する(ELISA)。健常者血清に比べ食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、膵臓癌、乳癌の6種の患者血清の抗体レベルが有意に高いペプチドを選択する。
(2) バキュロウイルスを用いてc-mycペプチドを精製して血清c-myc抗体検索のためのELISAキットを作成する。作成したELISAキットの性能試験を実施し、健常者の基準抗体価を設定する。健常者血清におけるELISA測定レベルの平均値+3SDをカットオフ値として、その値を上回ったものを陽性と判定する。
(3) 東邦大学医療センター大森病院で入院・加療した胃癌患者の血清を文書により本人の了解を得てスクリーニング用いる。また、文書により了解を得た健常者の血清をコントロールとして用いる。健常者は、癌検診において固形癌を有していないと診断された50歳以上の100名である。解析対象の食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、膵臓癌、乳癌の患者血清を治療前後に採取し、血清分離後にマイナス80度で凍結保存したものを使用する。
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[Presentation] Serum SEREX antibodies as new biomarkers for stage I/II gastric cancer.2010
Author(s)
Shimada H, Yamazaki K, Yajima S, Ooshima Y, Nanami T, Tamura A, Tsuchiya M, Maeda T, Suzuki T, Ootsuka Y, Kaneko H
Organizer
The 7th International Symposium on Cancer Research and Therapy
Place of Presentation
東京會舘(東京都)
Year and Date
2010-11-27
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