2010 Fiscal Year Annual Research Report
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22591470
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
石橋 由朗 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (00246373)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
志田 敦男 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教 (00338906)
小村 伸郎 東京慈恵会医科大学, 医学部, 准教授 (70271301)
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| Keywords | ユビキチン / SUMO-1 / 食道癌 |
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| Research Abstract |
食道癌における「ユビキチン類似蛋白質の意義の研究」を行い、以下の成果を認めた。
1. ウエスタンブロット
市販の抗SUMO-1抗体(monoclonal antibody 21C7)を用いてSUMO-1蛋白のウエスタンブロット分析を行った。食道癌培養細胞(KYSE50)による検討では、ユビキチンと同様に複数のバンドが検出された。これはユビキチン化蛋白質と同様にSUMO化された蛋白質を示していると考えらえたが、現在さらなる検討を加えている。今後は手術検体を用いて、非癌部、癌部との比較を行い、SUMO化蛋白質の発現の違いなどを検討する予定である。
2. 免疫組織化学的検討
食道扁平上皮癌96例を対象として、ホルマリン固定、パラフィン包埋切片を用いて抗SUMO-1抗体(PC603)を用いた免疫組織染色を行い検討した。SUMO-1は、43例に発現を認め、癌細胞の核および細胞質が染色性された。臨床病理学的因子との検討では、リンパ節転移、脈管侵襲に対して有意な結果を認めた。病期(p=0.086)、深達度(p=0.197)については進行により染色性が増加する傾向が認められた。
3. RNAiによるSUMO-1蛋白質発現抑制の予備実験
siRNAの導入条件の設定のために、FITC標識オリゴdsRNAを用いた導入実験を行ったが、取り込み率が30%程度のため十分な発現抑制が得られなかった。このためsiRNA導入後、添加から48-60時間後に細胞を回収し、ウエスタンブロットにより評価も行ったが、発現抑制(ノックダウン)の効果は十分ではなかった。現在条件設定を変えながら再評価を行っている。
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