2011 Fiscal Year Annual Research Report
3次元培養による疾患モデルを利用したHPV関連疾患に対するRNAi創薬の研究
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22592084
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
大和 建嗣 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (50174751)
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| Keywords | siRNA / GFP / 皮膚 |
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| Research Abstract |
RNAi医薬を実現するためには、よいsiRNA配列(高い遺伝子発現抑制活性、低い非特異反応)の選択とsiRNAの標的臓器/細胞への効率よいデリバリー法の開発が必要である。研究代表者は癌原性ウイルスであるヒトパピローマウイルス16型の癌遺伝子に対してこの条件を満たすsiRNA配列を同定し、この配列が治療に応用できる可能性を報告した。本研究では、レポーター遺伝子を導入した単層培養と、この3次元培養の疾患モデルを作成した。本年度は、扁平上皮内深部へ核酸導入を達成するために、elastic liposomeを作成し、その効果を検討した(連携研究者:星薬科大学米谷芳枝博士、服部喜之博士)。これはリポゾームに可塑剤を組み合わせて扁平上皮の細胞間隙を通過して深部に到達させるものである。単層培養での効果を確認後、EGFPマウスの皮膚にEGFPに対するsiRNAをelasic liposomeを用いて導入したところ、表皮内でのEGFPの発現低下が観察された。同時にβアクチンの発現低下も見られたため、細胞毒性がある事が判明した。今後、3次元培養法とEGFPマウスを用いてelastic liposomeの毒性の緩和と、siRNAの特異性(配列特異的切断)について検討を行なっていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
新しい扁平上皮へのデリバリー法の解析が進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在用いているデリバリー法の改善が難しい場合は、既存の膜貫通性ペプチドによるデリバリー法を検討に加えていきたい。
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[Journal Article] The E1 protein of human papillomavirus type 16 is dispensable for maintenance replication of the viral genome2012
Author(s)
Egawa, N., Nakahara, T., Ohnoa,S., Narisawa-Saitoa,M., Yugawa,T., Fujita,M. Yamato, K., Natori Y. and Kiyono, T
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Journal Title
J Virol
Volume: 86
Pages: 3276-3283
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Enhanced specificity of HPV16 E6E7 siRNA by RNA-DNA chimera modification2011
Author(s)
Yamato, K., Egawa, N., Endo, S., Ui-Tei, K., Yamada, T., Saigo, K., Hyodo, I., Kiyono, T. and Nakagawa, I
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Journal Title
Cancer Gene Ther
Volume: 18
Pages: 587-597
DOI
Peer Reviewed
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