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2013 Fiscal Year Annual Research Report

フリーズドライ体細胞を用いた家畜の遺伝資源保存・再生技術の開発

Research Project

Project/Area Number 22681035
Research InstitutionKochi University

Principal Investigator

松川 和嗣  高知大学, 教育研究部総合科学系, 准教授 (00532160)

Project Period (FY) 2010-04-01 – 2014-03-31
Keywords核移植 / 凍結乾燥 / 家畜 / 遺伝資源保存・再生
Research Abstract

本研究では、凍結乾燥によって調整したウシ線維芽細胞の特性について検討するために、凍結乾燥前後のタンパク質量、γ-チューブリン数、およびミトコンドリア膜電位を調査した。さらに、凍結乾燥細胞がそのゲノムを維持しているのかどうかをウシ除核卵子への核移植によって評価した。
ウシ線維芽細胞を200 μlあるいは500 μlの凍結乾燥液に浮遊させ凍結乾燥した。細胞の凍結乾燥前後のタンパク質量、γ-チューブリン数およびミトコンドリア膜電位は、それぞれSDS電気泳動、蛍光免疫染色、およびJC-1染色によって計測した。核移植には凍結乾燥後-30 ℃で1週間および1ヶ月間保存した細胞を供試し、ウシ除核未受精卵に注入した。核移植胚は38.5℃、5% CO2、5% O2の気相下で8日間培養し、卵割率および胚盤胞発生率を検討した。
凍結乾燥前と比較して凍結乾燥後のウシ線維芽細胞では、タンパク質およびγ-チューブリン数が減少した。さらに、凍結乾燥後の細胞にはミトコンドリア膜電位が認められなかった。1週間および1ヶ月間保存した凍結乾燥細胞を核移植したときの卵割率はそれぞれ50%および50%、胚盤胞発生率はそれぞれ28%および16%であった。以上の結果より、ウシ線維芽細胞は凍結乾燥によって、タンパク質量およびγ-チューブリン数が減少し、ミトコンドリア活性が消失するにもかかわらず、核ゲノムは維持され移植胚の発生が可能だと考えられた。

Current Status of Research Progress
Reason

25年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

25年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (4 results)

All 2014 2013

All Presentation (2 results) Book (2 results)

  • [Presentation] ウシ線維芽細胞の培養時期が細胞周期および凍結乾燥後のDNA損傷に与える影響2013

    • Author(s)
      郡七海,枝重圭祐,葛西孫三郎,赤木悟史,保地眞一,松川和嗣
    • Organizer
      第117回日本畜産学会大会
    • Place of Presentation
      新潟大学(新潟県新潟市)
    • Year and Date
      20130909-20130910
  • [Presentation] Production of bovine blastocysts by nuclear transfer using freeze-dried fibroblast cells2013

    • Author(s)
      Kazutsugu Matsukawa, Nanami Kori, Shinichi Hochi, Satoshi Akagi, Keisuke Edashige, Magosaburo Kasai, Pasqualino Loi
    • Organizer
      Society for the Study of Reproduction 46th Annual Meeting
    • Place of Presentation
      Palais dea congres de Montreal (カナダ、モントリオール)
    • Year and Date
      20130722-20130726
  • [Book] 畜産ハンドブック2014

    • Author(s)
      扇元敬司、他
    • Total Pages
      印刷中
    • Publisher
      講談社サイエンティフィック
  • [Book] Transgenic Animal Technology 3rd Edition2014

    • Author(s)
      Pinkert CA,他
    • Total Pages
      印刷中
    • Publisher
      ELSEVIER

URL: 

Published: 2015-05-28  

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