2011 Fiscal Year Annual Research Report
骨格筋特異的なカルパインシステムの機能と制御機構の解析
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22770139
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| Research Institution | 公益財団法人東京都医学総合研究所 |
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Principal Investigator |
小野 弥子 公益財団法人東京都医学総合研究所, 生体分子先端研究分野, 主席研究員 (20392376)
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| Keywords | カルパイン / 骨格筋 / プロテアーゼ / 自己消化活性 / サルコメア / 筋ジストロフィー |
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| Research Abstract |
骨格筋特異的カルパインシステムの重要な分子である、p94/カルパイン3はサルコメアタンパク質コネクチンとの相互作用が外れると、自己消化活性によって不安定化する。今年度は、主にサルコメア外におけるp94安定化機構とその意義の検討を行った。1) p94基質候補分子分解様式の解析：p94の新規結合タンパク質が、p94の自己消化活性を抑制することを見出したため、この分子(C5orf25)の解析を続けた。さらにこの分子に相互作用タンパク質を検索した結果、転写調節因子CTBP1との相互作用を見出した。CTBP1はp94を始めカルパインの良い基質であり、p94による分解がCTBP1の高次構造を認識し、その調節に関与していることが示唆された。2) ミトコンドリアや筋小胞膜に重点をおいた骨格筋プロテオミクス解析の条件検討：p94のノックアウトとノックインマウスから精製したミトコンドリアについてプロテオーム解析を行った。複数のサンプルを解析するための、方法や条件の設定が期待したように順調ではなかったが、網羅的にデータを取得するということが安定して行えるようになった。マウスの表現型（ミトコンドリアの機能異常）の程度と特定のタンパク質の量的変動の間にどのような関係があるか、という点について今後絞って解析したい。3) p94の活性が関与する細胞内分子ネットワークと筋機能の関係について：上述のC5orf25について、p94の活性を制御する一方でCTBP1との結合により適切な基質タンパク質がp94と相互作用することを促進することが示唆された。初代培養したトリ骨格筋細胞におけるC5orf25の局在を検討した結果、主に細胞質に一様に局在するが、ごく一部はサルコメアへの局在が観察された。以上により、サルコメア内外においてp94を制御する分子機構が複数存在し、局在部位ごとに機能分担していることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(14 results)
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[Journal Article] Does the severity of the LGMD2A phenotype in compound heterozygotes depend on the combination of mutations?2011
Author(s)
Saenz, A., Ono, Y., Sorimachi, H., Goicoechea, M., Leturcq, F., Blazquez, L., Garcia-Bragado, F., Marina, A., Poza, J.J., Azpitarte, M., Doi, N., Urtasun, M., Kaplan, J.C., Lopez de Munain, A
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Journal Title
Muscle Nerve
Volume: 44
Pages: 710-714
DOI
Peer Reviewed
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