2010 Fiscal Year Annual Research Report
姉妹染色分体間の接着確立とDNA複製のクロストーク
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22770168
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
古俣 麻希子 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 特任助教 (30572911)
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Keywords | 遺伝子 / ゲノム / 細胞・組織 |
Research Abstract |
研究目的;DNA複製により生じた姉妹染色体分体の間にはコヒーシン複合体による接着が形成され、この接着は正確な分配に必須なことが知られている。細胞周期のDNA合成期には、ゲノム維持に重要な二つの事象、DNA複製と接着の形成が並行して進行していることになるが、この両者間にどのような連携があるか未だに明らかでない。そこで、DNA複製と接着因子コヒーシンが互いにどのように制御し合い、その特異的役割を保障しているか、連携メカニズムを研究対象とし、実験を開始している。 研究方法;出芽酵母を実験材料とし、分子生物学的手法を用いて実験を行う。すでに接着に必要とされる接着因子コヒーシンのアセチル化を特異的に認識する抗体の製作に成功している。この抗体を用い、一本の染色体上でのアセチル化されたコヒーシンの局在を、ChIP-Chip解析法、ChIP-seq解析法を用いて研究を進めた。解析に用いた手法は、すべて研究室内で機能し、成果を上げているものであり、必要機器類も備えられている。 研究成果;まず、アセチル化コヒーシンを特異的に認識する抗体を用い、免疫沈降効率を向上させる条件等(細胞固定条件、破砕条件等)の最適化を量った。その結果、免疫沈降回収率が増加した。現在、染色体上に特異的にアセチル化コヒーシンシグナルを捉えられるか、CHIP-Chip解析に必要十分量のDNA量を得るため、免疫沈降物の増幅条件を検討中である。これらの改善により、DNA合成期途中の細胞においてアセチル化コヒーシンが複製の完了した染色体領域に現れるかどうかを調べることで、接着確立と複製とが共役しているかを示す明確な結果を得る。
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Research Products
(1 results)