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2023 Fiscal Year Research-status Report

大腸癌におけるmiRNA146bの制御分子の解析を基にした癌間質マーカーの同定

Research Project

Project/Area Number 22K06986
Research InstitutionToho University

Principal Investigator

深澤 由里  東邦大学, 医学部, 講師 (90392331)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 藤澤 千恵  東邦大学, 医学部, 講師 (10393000)
Project Period (FY) 2022-04-01 – 2025-03-31
Keywords大腸癌 / 癌間質
Outline of Annual Research Achievements

miR146b-5pの大腸癌癌間質における働きを検討するため、miR146b-5pのノックアウトSDラット(KOラット)と野生型SDラット(Wildラット)に1,2-dimethylhydrazineを皮下投与し、大腸癌を発生させた。観察期間をそろえ、KOラット、Wildラットいずれも15匹で検討したところ、KOラットでは全腫瘍数57個、Wildラットでは61個であった。それらの平均腫瘍径は4.6±2.4㎜、3.9±2.6㎜とKOラットの方がやや大きいものの有意な差をみとめなかった。深達度はおよび組織型についても両群に差をみとめなかった。
連続切片において、Masson-trichrome染色(MT染色)およびSirius-Red染色(SR染色)を施行し、癌間質について画像解析を施行した。MT染色において高い密度の膠原線維を示す濃い青色を指定し「高密度膠原線維」として間質における割合を算出したところ、KOラットはWildラットと比して「高密度膠原線維領域」の割合が有意に高いことがわかった(p=0.003)。また、SR染色において指定した黄色調領域を「低密度1型コラーゲン領域」、白色調領域を「高密度1型コラーゲン領域」、緑色調領域を「3型コラーゲン領域」として間質領域におけるそれぞれの面積の割合を算出した。KOラットはWildラットと比較して高密度1型コラーゲン領域」の割合が有意に高かった(p=0.037)。以上より、KOラットとWildラットは、大腸癌の癌間質の膠原線維の形成に差があり、そこにmiR146b-5pが関与している可能性が考えられた。今後、コラーゲンなどの免疫組織化学染色を施行し、癌間質の性質の違いなど詳細に検討していく。
ラットの腫瘍組織より初代培養線維芽細胞を得、単離された線維芽細胞を用いて、分子病理学的に解析を進める予定である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

画像解析の方法を決定するのに想定以上の時間がかかってしまい、画像解析に遅れが生じた。また、腫瘍組織より初代培養細胞の樹立を試みているが、方法の検討に時間がかかり、また手技的な問題もあり、上手く培養細胞を得ることができず、想定以上の時間がかかっている。

Strategy for Future Research Activity

培養手技に関しては、培養に熟知している研究分担者にアドバイスを仰ぎ、検討を重ね、練習することで解決できると考える。
発現解析などは外注することで、実験を先に進められると考えている。

Causes of Carryover

培養細胞の樹立ができなかったため、解析に関する費用を使用できなかったため、次年度に解析費用として持ち越す予定である。

  • Research Products

    (1 results)

All 2023

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] miRNA146b-5pKOラットにおける大腸癌癌間質の病理組織学的検討2023

    • Author(s)
      深澤 由里
    • Organizer
      第113回日本病理学会総会

URL: 

Published: 2024-12-25  

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