2022 Fiscal Year Research-status Report
CRISPR screen to identify novel molecular mechanisms of HIV-1 latency
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22K07085
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
白川 康太郎 京都大学, 医学研究科, 助教 (80728270)
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2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | HIV / 潜伏感染 / shock and kill / 潜伏感染再活性化薬 / HIV感染症根治療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
二重蛍光レポーターHIVGKOを感染させたJurkat T細胞からmKO陽性の潜伏感染細胞モデル(JGL)を用いてCRISPRスクリーニングを行い、ノックアウトによりHIV転写の活性化を示す４遺伝子を同定した。JGL細胞およびGFPレポーターをもつJ-Lat細胞株6.3, 8.4, 11.1および5A8をもちいてこれらの遺伝子のノックアウトによりHIV転写が活性化することを確認した。この際、ウエスタンブロットでGagの発現を確認できた。さらにTet-on shRNAを用いてこれらの遺伝子のノックダウンが同様にHIV転写を活性化することを示した。また、これらの遺伝子に関連する化合物を培地に添加することでJGLおよびJ-LatのHIV転写の活性化が誘導され、新たなメカニズムの潜伏感染再活性化薬として作用することを発見し研究を継続している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
関連する化合物のスクリーニングが進んでおりポジティブヒットを発見しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き化合物によるJGL細胞のHIV転写再活性化の分子メカニズムを明らかにする。
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| Causes of Carryover |
他の研究費で試薬が賄えたため。計画に変更なし。
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