Development of gene targeting technology using nuclear transfer donor DNA plasmids.

2023 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 22K15029
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 42040:Laboratory animal science-related
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: Ishibashi Riki 京都大学, 医生物学研究所, 助教 (20778279)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: ゲノム編集 / 遺伝子ターゲッティング / CRISPR-Cas9 / CRISPR-Cas12a

Outline of Final Research Achievements

In this study, a highly versatile donor plasmid pCriMGET_9-12a （plasmid of synthetic CRISPR coded RNA target sequence-equipped donor plasmid mediated gene targeting via Cas9 and Cas12a）system was used to establish more than 20 new lines of genetically modified mice. It was also demonstrated that gene targeting using the pCriMGET_9-12a system is feasible in vivo in mice.

Free Research Field

分子生物学

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究により開発されたpCriMGET_9-12a systemにより、CRISPR-Cas9だけではなくCRISPR-Cas12aを用いても効率的な長鎖DNAノックイン個体の樹立が可能となった。plasmid DNAはRIKEN BRCに寄託しオープンソースとすることで、様々な生命科学研究の発展に貢献することが期待される。また、pCriMGET_9-12a systemは生体内における遺伝子ターゲッティングにも利用可能である事が明らかとなり、非ウイルス型の生体内遺伝子ターゲッティング技術としてより安全な遺伝子治療法の開発に貢献することが期待される。